Anti-Mesothelin Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q13421

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Mesothelin-Funktion und Lokalisierung

• Mesothelin ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein, das vom MSLN-Gen (Gene ID: 10232) kodiert wird. Es wird als Vorläufer synthetisiert und in eine membranverankerte Form sowie einen sekretierten Megakaryozyten-potenzierenden Faktor (MPF) gespalten.
• Die membrangebundene Form ist über einen GPI-Anker befestigt und wird als Vermittler der Zelladhäsion angesehen, was möglicherweise zur Tumormetastasierung und peritonealen Disseminierung beiträgt.
• Das sekretierte MPF-Fragment (auch bekannt als CAK1-Antigen) hat in vitro die Megakaryozyten-Koloniebildung verstärkt, was auf eine Rolle bei der Hämatopoese hindeutet.
• Mesothelin ist primär in der Zellmembran und dem Golgi-Apparat lokalisiert, wobei eine gespaltene lösliche Form ebenfalls extrazellulär sekretiert wird.
• Auf Proteinebene wird Mesothelin stark in Mesotheliomen, Eierstockkrebs und bestimmten Plattenepithelkarzinomen exprimiert, während normales Gewebe eine begrenzte Expression in Mesothelzellen und der Lunge sowie ein niedriges Expressionsniveau in Herz, Plazenta und Niere aufweist.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung; das Protein wird zudem an einem Paar basischer Reste gespalten, um die reifen Formen zu ergeben.
• Alternatives Spleißen des MSLN-Transkripts erzeugt mehrere Isoformen, was zur funktionellen Diversität beiträgt.
• Mesothelin dient aufgrund seines differentiellen Expressionsmusters und seiner Beteiligung am Fortschreiten von Krebserkrankungen als vielversprechender Tumorbiomarker und therapeutisches Ziel.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen war ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 296–606 des humanen Mesothelins (NP_037536.2) umfasst. Dieser Bereich deckt die reife membrangebundene Form ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl die membranverankerte als auch die freigesetzte Form erkennen kann.
• Beim Western Blotting (WB) wird der Nachweis von endogenem Mesothelin bei etwa 69 kDa erwartet; aufgrund von Glykosylierung und Spaltung können jedoch mehrere Banden oder ein Schmierstreifen beobachtet werden. Erwägen Sie die Verwendung von Deglykosylierungskontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) ist eine Membranfärbung in Mesothel- und Tumorgewebe zu erwarten. Kern- oder Zytoplasmafärbungen sollten vorsichtig interpretiert werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Paarung dieses Antikörpers mit einem Detektionsantikörper, der auf ein nicht überlappendes Epitop abzielt, helfen, Wettbewerb zu vermeiden. Validieren Sie die Leistung im relevanten Probensystem unter Verwendung von rekombinantem Protein oder Tumorzelllysaten.

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