Anti-Mesothelin Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q13421

Kerndaten und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Mesothelin-Funktion und -Lokalisierung

• Mesothelin, codiert durch das MSLN-Gen, ist auch bekannt als CAK1-Antigen und prä-pro-Megakaryozyten-potenzierender Faktor und unterliegt alternativem Spleißen, um verschiedene Isoformen zu produzieren.
• Die membranverankerte Form von Mesothelin kann eine Rolle bei der zellulären Adhäsion spielen und zu Zell-Zell-Interaktionen beitragen.
• Die Megakaryozyten-potenzierende Faktor (MPF)-Domäne, die nach Spaltung freigesetzt wird, kann die Bildung von Megakaryozytenkolonien in vitro verstärken.
• Mesothelin ist an der Zellmembran lokalisiert, verankert über einen GPI-Anker, und auch im Golgi-Apparat nachweisbar; es kann nach proteolytischer Spaltung sezerniert werden.
• Es wird in normalem Lungengewebe und in geringen Mengen in Herz, Plazenta und Niere exprimiert; in Mesothelzellen sowie auf Proteinebene stark exprimiert in Mesotheliomen, Ovarialkarzinomen und einigen Plattenepithelkarzinomen.
• Das Protein unterliegt mehreren Modifikationen, einschließlich Spaltung an einem Paar basischer Reste, N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung.
• Wichtige strukturelle Merkmale umfassen ein Signalpeptid, einen GPI-Anker und das Vorhandensein mehrerer Domänen, die durch 3D-Strukturstudien identifiziert wurden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid, das die Aminosäuren 500–600 von humanem Mesothelin umfasst; dieser Bereich befindet sich im C-terminalen Teil des Proteins. Bei Verwendung dieses Antikörpers sollten Sie bedenken, dass er je nach Probenaufbereitung sowohl das全长-Präkursorprotein als auch das reife Mesothelin oder das MPF-Fragment erkennen kann.
• Für den Western Blot (WB) ist unter reduzierenden Bedingungen eine Bande um 69 kDa zu erwarten (entsprechend den 68 kDa laut UniProt-Vorhersage). Validieren Sie das beobachtete Molekulargewicht in Ihren spezifischen Zell- oder Gewebelysaten.
• Optimieren Sie bei der Immunfluoreszenz von Paraffin-schnitten (IF-P) die Antigen-Retrieval und Permeabilisierung, um membranassoziiertes oder im Golgi lokalisiertes Mesothelin effektiv nachzuweisen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie die Leistung des Antikörpers als Capture- oder Detektionsreagenz nach empirischen Paarungstests bewerten und gegen rekombinantes Mesothelin oder natürliche Ziele in geeigneten Matrizes validieren.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch und Ratte berichtet; bestätigen Sie bei Arbeiten mit Rattenproben die Spezifität und Empfindlichkeit unter Ihren experimentellen Bedingungen, da die Epitopkonservierung variieren kann.

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