Anti-MERS-CoV Spike RBD Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - K9N5Q8

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des MERS-CoV Spike-Glykoproteins

• Das Spike-Glykoprotein (S) vermittelt den Viruseintritt durch Bindung an den Wirtsrezeptor DPP4 (Dipeptidyl-Peptidase 4) und erleichtert die Membranfusion (UniProt K9N5Q8).
• Es handelt sich um ein Klasse-I-Virusfusionsprotein; während der Fusion bilden seine Coiled-Coil-Regionen eine Trimer-of-Hairpins-Struktur, die die Membranapposition und -fusion vorantreibt.
• Das Protein wird proteolytisch in S1- und S2-Untereinheiten gespalten; die Rezeptorbindungsdomäne (RBD) befindet sich innerhalb von S1, während das Fusionspeptid in S2 nach endosomaler Spaltung freigelegt wird.
• Kodiert durch das S-Gen, ist es ein wichtiger Virulenzfaktor und das primäre Ziel neutralisierender Antikörper (UniProt-Keywords: Virulence, Viral envelope protein).
• Subzellulär lokalisiert es in der Virushülle, der Membran des endoplasmatischen Retikulum-Golgi-Zwischenkompartiments des Wirts und der Wirtszellmembran (UniProt SUBCELLULAR LOCATION).
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Palmitoylierung, die für die Proteinfaltung und -funktion entscheidend sind.
• Das vollständige Spike-Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 149 kDa (UniProt Mol Weight: 149,411 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 18-725 der RBD) deckt die Rezeptorbindungsdomäne ab, die für die Interaktion mit dem Wirts-DPP4 entscheidend ist; dieser Antikörper könnte für Anwendungen geeignet sein, die die RBD-Rezeptor-Bindung untersuchen.
• Für Western Blot wird eine Bande um 149 kDa erwartet; Glykosylierung kann leichte Mobilitätsverschiebungen verursachen. Erwägen Sie den Einsatz von Deglykosylierungskontrollen, wenn unspezifische Banden auftreten.
• Bei Immunfluoreszenz-Experimenten sollte die Lokalisierung des Proteins an intrazellulären Membranen und der Zelloberfläche berücksichtigt werden; Permeabilisierungsprotokolle müssen für den intrazellulären Nachweis optimiert werden.
• In ELISA-Aufbauten kann rekombinantes Spike RBD (z.B. YP_009047204.1) als positive Kontrolle für die Antikörpertitration und Bindungspezifitätstests dienen.

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