Monoklonaler Anti-MEK1/MEK2-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q02750 / P36507

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) und MEK2 (MAP2K2) sind dualspezifische Proteinkinasen, die als wichtige Komponenten der MAPK/ERK-Signalkaskade fungieren und Signale von aktiviertem RAS an ERK weiterleiten.
• Sie katalysieren die Phosphorylierung von Threonin- und Tyrosinresten im Thr-Glu-Tyr-Motiv von MAPK3/ERK1 und MAPK1/ERK2, was zu deren Aktivierung und zur Weiterleitung nachgeschalteter Signale führt, die an Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung beteiligt sind.
• MEK1 aktiviert BRAF auf KSR1- oder KSR2-abhängige Weise, wodurch hemmende intramolekulare Wechselwirkungen aufgehoben werden und die Dimerisierung und Aktivierung von BRAF gefördert wird. Verwandte Referenz: PMID:29433126
• Auf subzellulärer Ebene kommt MEK1 im Zytoplasma vor, einschließlich Zentrosomen und Spindelpolen, und kann zwischen Zellkern und Membran pendeln, was seine dynamische Rolle bei der Signaltransduktion widerspiegelt.
• MEK1 wird in verschiedenen Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei die Spiegel im Gehirn besonders niedrig sind.
• Das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, darunter Phosphorylierung und Acetylierung, und enthält Kinasedomänen, die ATP und Nukleotidsubstrate binden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 170–270 von humanem MEK1 und MEK2 entspricht, einer Region, die wahrscheinlich innerhalb der Kinasedomäne liegt; es sollte in Betracht gezogen werden, die Epitopspezifität durch Peptidkonkurrenz oder Mutagenese zu überprüfen.
• Für den Western Blot sollten Ganzzelllysate aus humanen, murinen oder Ratten-Zelllinien verwendet werden; ein spezifisches Band nahe 44 kDa wird erwartet. Optimieren Sie die Blockierung und die Antikörperverdünnung für eine Detektion mit geringem Hintergrund.
• Für IHC-P werden eine Antigenretrieval-Methode (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) und eine Titration des Primärantikörpers an bekannten positiven Kontrollgeweben (z. B. Kolonkarzinom) empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; die Kombination mit geeigneten Antigenstandards sowie die Kreuzreaktivität mit MEK1/MEK2-Paralogen sollte validiert werden.
• Bestätigen Sie die Zielspezifität anhand von MEK1/MEK2-Knockout- oder Knockdown-Modellen der entsprechenden Spezies.

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