Anti-MEK1/MEK2 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q02750/P36507

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MEK1/MEK2-Funktion und Lokalisierung

• MEK1 (MAP2K1) und MEK2 (MAP2K2) sind eng verwandte Dual-Spezifitäts-Kinasen, die als essentielle Komponenten des Mitogen-aktivierten Protein (MAP)-Kinase-Signaltransduktionswegs dienen.
• In der MAPK/ERK-Kaskade werden MEK1/2 durch RAF-Kinasen aktiviert und phosphorylieren anschließend ERK1/2 an Threonin- und Tyrosinresten innerhalb eines Thr-Glu-Tyr-Motivs, was zur ERK-Aktivierung führt.
• Es wurde gezeigt, dass MEK1 BRAF auf KSR1- oder KSR2-abhängige Weise aktiviert, hemmende intramolekulare Wechselwirkungen aufhebt und die BRAF-Dimerisierung fördert. Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Der Weg vermittelt vielfältige biologische Funktionen wie Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung, hauptsächlich durch Regulation von Transkription, Stoffwechsel und Zytoskelett-Umstrukturierungen.
• MEK1 exportiert den nukleären Rezeptor PPARG aus dem Zellkern und verbindet so die Kaskade mit der nukleären Rezeptorsignalgebung.
• Die MAPK/ERK-Kaskade ist auch an der Regulation der endosomalen Dynamik beteiligt, einschließlich Lysosomenprozessierung und Endosomenzyklus, und trägt zur Golgi-Fragmentierung während der Mitose bei.
• MEK1 ist weitgehend in humanen Geweben exprimiert, mit extrem niedrigen Leveln im Gehirn.
• Subzellulär lokalisiert MEK1 im Zytoplasma, Zytoskelett, Zentrosom, Spindelpol, Zellkern und an der Membran.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Acetylierung, und alternatives Spleißen führt zu multiplen Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–360) von humanem MEK1, einer Sequenz, die in MEK2 hochkonserviert ist; dies deutet darauf hin, dass der Antikörper beide Kinasen erkennen könnte. Validieren Sie die Spezifität mit relevanten Knockout- oder Knockdown-Kontrollen.
• Für Western Blot erwarten Sie ein Band bei etwa 44 kDa. Optimieren Sie die Lademengen und Antikörperverdünnungen für Ihren spezifischen Probentyp (z.B. Ganzzelllysate) und schließen Sie geeignete positive (z.B. HeLa, A431) und negative Kontrollen ein.
• Von diesem Antikörper wird berichtet, dass er mit Maus und Ratte kreuzreagiert. Bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem experimentellen System, wenn Sie mit diesen Spezies arbeiten.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie die Kombination mit einem geeigneten Detektionsantikörper für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA in Betracht ziehen; eine Titrationsoptimierung kann erforderlich sein.
• Wegen der kritischen Rolle von MEK1/2 in der Zellsignalgebung kann die Behandlung mit Weg-Aktivatoren/Inhibitoren (z.B. Wachstumsfaktoren, U0126) verwendet werden, um die Signalintensität in Ihren Assays zu modulieren.

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