Anti-MEK1 monoklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IP, ELISA - Q02750

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: MEK1-Funktion und Lokalisierung

• MEK1 (MAP2K1) ist eine duale Spezifitäts-Proteinkinase, die als kritischer Knotenpunkt in der RAS-RAF-MEK-ERK-Signaltransduktionskaskade dient und sowohl Threonin- als auch Tyrosinreste auf ERK1/2 (MAPK3/MAPK1) zur vollständigen Aktivierung phosphoryliert.
• Das Protein ist gewebeübergreifend weit verbreitet, mit bemerkenswert niedrigen Spiegeln im Gehirn, und alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen (gemäß UniProt-Schlüsselwörtern).
• MEK1 wird durch Phosphorylierung durch RAF-Kinasen (RAF1, BRAF, ARAF) als Reaktion auf extrazelluläre Wachstumsfaktoren, Zytokine und Hormone, die an Zelloberflächenrezeptoren binden, aktiviert.
• MEK1 fungiert auch als Gerüstprotein, um die BRAF-Aktivierung zu fördern, indem es an KSR1 oder KSR2 bindet, hemmende Wechselwirkungen löst und die BRAF-Dimerisierung erleichtert (PubMed:29433126). Zugehörige Referenzen: PMID:29433126
• Subzellulär lokalisiert MEK1 im Zytoplasma, Zentrosom, Spindelpol, Zellkern und an der Membran, was mit seinen Rollen bei der Mitose, dem endosomalen Transport und der Golgi-Fragmentierung übereinstimmt.
• Die Kinase koordiniert vielfältige zelluläre Prozesse, einschließlich Proliferation, Differenzierung, Adhäsion, Überleben, Stoffwechsel und Zytoskelett-Reorganisation durch ERK-vermittelte Regulation von Transkriptionsfaktoren und Kernrezeptoren (z. B. PPARG-Kernexport).
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung modulieren die MEK1-Aktivität, und genetische Varianten werden mit Kardiomyopathien, ektodermaler Dysplasie und geistiger Behinderung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 150–250 des menschlichen MEK1 abdeckt – eine Region innerhalb der Kinasedomäne, die bei Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert ist, was die berichtete Kreuzreaktivität erklärt. Erwägen Sie die Überprüfung der Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System.
• Für WB ist eine Bande bei etwa 43 kDa zu erwarten. Überwachen Sie die Gelmigration, da MEK1 bei Phosphorylierung oder anderen Modifikationen leichte Verschiebungen aufweisen kann.
• IP-Experimente können nach Standardprotokollen durchgeführt werden; optimieren Sie die Antikörper-zu-Lysat-Verhältnisse und Inkubationsbedingungen für Ihren jeweiligen Zell-/Gewebetyp.
• Im ELISA kann dieser Antikörper zur direkten Antigen-Erfassung oder zum Nachweis von rekombinantem MEK1 verwendet werden. Fügen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• Angesichts der zentralen Rolle von MEK1 bei der MAPK-Signalübertragung stellen Sie sicher, dass Ihre experimentellen Bedingungen (z. B. Serumhunger, Stimulation) gut kontrolliert sind, um aktivierungsabhängige Effekte interpretieren zu können.

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