Anti-MEK1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q02750

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MEK1-Funktion und -Lokalisierung

• MEK1 (MAP2K1) ist eine dual-spezifische Kinase, die sowohl Threonin- als auch Tyrosinreste in der Aktivierungsschleife von ERK1/2 (MAPK3/1) phosphoryliert, ein kritischer Schritt in der MAPK/ERK-Signalkaskade.
• Wirkt stromabwärts von RAS-RAF1 und ist essentiell für die Übertragung von Signalen von Zelloberflächenrezeptoren zu intrazellulären Effektoren, wodurch Prozesse wie Zellproliferation, Differenzierung und Überleben reguliert werden.
• MEK1 aktiviert BRAF über einen KSR1/KSR2-abhängigen Mechanismus, hebt die BRAF-Autoinhibition auf und verstärkt die Signalweiterleitung. Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Die subzelluläre Lokalisierung erstreckt sich auf Zytoplasma, Zentrosom, Spindelpol, Zellkern und Membran, was seine Rolle in der Mitose (Golgi-Fragmentierung), dem endosomalen Transport und dem Kernexport (z.B. PPARG) widerspiegelt.
• Weit verbreitet in humanen Geweben exprimiert, mit besonders niedrigen Leveln im Gehirn. Krankheitsassoziierte Mutationen sind mit Kardiomyopathie, ektodermaler Dysplasie und intellektueller Beeinträchtigung verbunden.
• Gehört zur Familie der MAP-Kinase-Kinasen, zu der auch MEK2 (MAP2K2) zählt, und wird durch Phosphorylierung und Acetylierung reguliert.
• Der von MEK1 getriebene MAPK/ERK-Signalweg beeinflusst die Lokalisierung des nukleären Rezeptors PPARG und integriert so metabolische und apoptotische Signale.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen war ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–100 von humanem MEK1 entspricht. Epitop-Mapping deutet auf eine Erkennung der N-terminalen Region hin, die gut konserviert ist; Kreuzreaktivität mit MEK2 sollte jedoch experimentell ausgeschlossen werden, wenn Spezifität kritisch ist.
• Für Western Blot wird eine Bande bei etwa 43 kDa erwartet. Validieren Sie mit einem positiven Kontrolllysat von humanen, murinen oder Rattens-Zelllinien, die MEK1 exprimieren (z.B. HeLa, NIH/3T3, PC12).
• Für Immunfluoreszenz/ICC optimieren Sie die Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen, da MEK1 je nach Zellzustand zytosolisch, membranassoziiert oder nukleär sein kann.
• Für die Immunpräzipitation verwenden Sie ein mildes Lysepuffer, um Proteininteraktionen zu erhalten. Erwägen Sie eine Vernetzung, wenn eine Co-IP von MAPK-Signalwegkomponenten gewünscht ist.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Nachweis von rekombinantem oder endogenem MEK1 eingesetzt werden; titrieren Sie und setzen Sie geeignete Kontrollen ein.

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