Anti-ME3 (NADP-ME) Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16798

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ME3 Funktion und Lokalisation

• ME3 (Malic enzyme 3) ist ein mitochondriales NADP-abhängiges Malatenzym, das die oxidative Decarboxylierung von (S)-Malat zu Pyruvat und CO₂ katalysiert, mit NADP+ als Kofaktor. Verwandte Referenzen: PMID:7818469
• Es kann auch die Decarboxylierung von Oxalacetat zu Pyruvat katalysieren, allerdings mit geringerer Effizienz.
• Die Umkehrreaktion (reduktive Carboxylierung von Pyruvat zu Malat) ist möglich, verläuft aber mit deutlich geringerer Effizienz.
• ME3 lokalisiert in der mitochondrialen Matrix, wo es an der zentralen Kohlenstoffstoffwechsel beteiligt ist.
• Das Protein durchläuft alternatives Spleißen, wodurch mehrere Isoformen entstehen, und wird durch Phosphorylierung reguliert (Schlüsselwort Phosphoprotein).
• Es wird überwiegend in Organen mit geringen Zellteilungsraten exprimiert, was auf eine Rolle in Geweben mit reduzierter Proliferationsaktivität hindeutet.
• Schlüsselwörter umfassen 3D-Struktur, Metallbindung, NADP, Oxidoreduktase und Referenzproteom, was seine gut charakterisierte enzymatische Funktion bestätigt.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 505–604 nahe dem C-Terminus des menschlichen ME3 entspricht; diese Region ist voraussichtlich sowohl in nativen als auch denaturierten Proteinkonformationen zugänglich.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von ME3 etwa 67 kDa; validieren Sie mit einem Positivkontroll-Lysat aus menschlichem, Maus- oder Rattengewebe, von dem bekannt ist, dass es ME3 exprimiert.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Methoden zur Antigen-Retrieval und Gewebe mit geringen Proliferationsraten verwenden, da die ME3-Expression in solchen Organen angereichert ist.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann die mitochondriale Färbung eine Permeabilisierung erfordern; die Kolokalisierung mit mitochondrialen Markern kann die Spezifität bestätigen.
• Bei der Verwendung von ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; es werden Vorexperimente zur Optimierung der Beschichtungskonzentration und Blockierungsbedingungen empfohlen.

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