Anti-ME1-Polyklonaler Antikörper (WB, ELISA) - P48163

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ME1-Funktion und Lokalisierung

• Das NADP-abhängige Malatenzym (ME1) ist ein zytosolisches Enzym, das die oxidative Decarboxylierung von (S)-Malat zu Pyruvat und CO2 katalysiert, wobei NADP+ als Kofaktor verwendet wird, und decarboxyliert auch Oxalacetat.
• ME1 spielt eine entscheidende Rolle bei der Lipidbiosynthese, indem es NADPH für Reduktionsreaktionen bereitstellt, und ist eine wichtige Verbindung zwischen der Glykolyse und dem Citratzyklus.
• Das Protein ist in menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, mit bemerkenswerten Spiegeln in Leber, Plazenta und weißem Fettgewebe.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die die Enzymaktivität und die subzelluläre Lokalisierung regulieren können.
• Das ME1-Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch mehrere Transkriptvarianten entstehen, die zur funktionellen Vielfalt beitragen.
• Strukturuntersuchungen (3D-Struktur verfügbar) zeigen eine konservierte Architektur des aktiven Zentrums, die typisch für Malatenzyme ist, und die Bindung von zweiwertigen Metallionen und NADP+.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst den N-terminalen Bereich (aa 1-300) von humanem ME1, der zwischen Mensch, Maus und Ratte gut konserviert ist, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität übereinstimmt. Validieren Sie im entsprechenden Probenystem, wenn andere Spezies verwendet werden.
• Für Western Blot sind Ganzzelllysate aus Geweben oder Zelllinien, die ME1 exprimieren (z. B. Leber, Fettgewebe oder Krebszelllinien), geeignet; erwägen Sie die Verwendung einer Positivkontrolle wie HepG2- oder 3T3-L1-Lysate. Eine Bande in der Nähe von 64 kDa wird erwartet.
• Für ELISA kann die Beschichtung mit rekombinantem ME1-Protein oder dem Immunogen-Peptidfragment optimiert werden; führen Sie Titrationsversuche durch, um die optimale Antikörperverdünnung und Beschichtungskonzentration zu bestimmen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Charge-zu-Charge-Variation die Leistung beeinträchtigen; es ist ratsam, kritische Anwendungen mit jeder neuen Charge erneut zu validieren.

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