Anti-MCM5 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P33992

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MCM5-Funktion und Lokalisierung

• MCM5 (CDC46/P1-CDC46) ist der DNA-Replikations-Lizenzierungsfaktor und eine Kernkomponente des MCM2-7-Komplexes, der eukaryotischen Replikationshelikase, die für den Einleitungs- und Elongationsschritt der einmal-pro-Zellzyklus DNA-Replikation unerlässlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:40940420

• Zusammen mit CDC45 und GINS bildet MCM5 die CDC45-MCM-GINS (CMG)-Helikase, die doppelsträngige DNA an Replikationsgabeln entwindet und als zentrale Plattform für die Replisom-Assembly dient. Verwandte Referenzen: PMID:16899510, PMID:32453425, PMID:34694004

• Der MCM2-7-Ring enthält sechs ATPase-aktive Stellen, die an den Schnittstellen zwischen Untereinheiten gebildet werden; MCM5 trägt ein konserviertes Arginin-Finger-Motiv zur ATP-Bindungstasche der benachbarten Untereinheit bei und leistet unterschiedliche Beiträge zur Helikaseaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:32453425

• MCM5 lokalisiert im Zellkern und ist in einem zellzyklusabhängigen Muster an Chromatin gebunden, wobei es eine kritische Rolle bei der Replikationslizenzierung und dem Fortschreiten der S-Phase spielt.

• Posttranslationale Modifikationen einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und ubiquitin-ähnlicher Konjugation regulieren die Stabilität und Aktivität von MCM5.

• MCM5 ist essenziell für die genomische Stabilität; Mutationen im MCM5-Gen sind mit dem Meier-Gorlin-Syndrom 8 (MGORS8) und anderen Entwicklungsstörungen verbunden.

• MCM5 ist ein Mitglied der MCM-Familie von ATP-abhängigen Helikasen, teilt konservierte Domänen mit MCM2-7 und ist in proliferierenden Zellen hoch exprimiert.

• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~82 kDa und enthält Nukleotid-bindungsmotive, die für seine enzymatische Funktion kritisch sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 1–230 von humanem MCM5 umfasst) zielt auf die N-terminale Region ab, die konservierte Motive enthält; eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen wurde beobachtet. Für nicht aufgeführte Spezies überprüfen Sie bitte die Sequenzhomologie vor der Verwendung.
• Für Western Blot (WB) empfiehlt sich eine Startverdünnung von 1:500–1:2000 und die Verwendung von Kern- oder Ganzzellextrakten aus proliferierenden Zellen, in denen MCM5 reichlich vorhanden ist. Der vorhergesagte Band liegt bei ~82 kDa; beachten Sie, dass Phosphorylierung leichte Mobilitätsverschiebungen verursachen kann.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) zeigt MCM5 eine kernständige, zellzyklusabhängige Färbung; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um das chromatingebundene Protein zu erhalten.
• Für die Immunpräzipitation (IP) kann der Antikörper natives MCM5 und den damit assoziierten MCM-Komplex anreichern; validieren Sie die Co-IP anderer MCM-Untereinheiten, um die Integrität des Komplexes zu bestätigen.

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