Anti-Mast Cell Tryptase (TPSB2) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q15661

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Tryptase alpha/beta-1

• Tryptase alpha/beta-1 (UniProt: Q15661), auch bekannt als Tryptase I oder Tryptase alpha-1, ist eine Serinprotease, die vom TPSAB1-Gen kodiert wird. Sie weist eine hohe Sequenzhomologie zu TPSB2 (Tryptase beta-2) auf.
• Sie fungiert als die wichtigste neutrale Protease in den sekretorischen Granula der Mastzellen und wird während der Mastzellendegranulation freigesetzt, wobei sie eine Schlüsselrolle bei entzündlichen und allergischen Reaktionen spielt.
• Die Protease ist an der angeborenen Immunität durch die Spaltung verschiedener Substrate beteiligt. Isoform 2 (auch als Tryptase beta-1 bezeichnet) zeigt eine differenzierte Substratspezifität und spaltet große Substrate wie Fibronectin effizienter, verarbeitet jedoch kleine Substrate im Vergleich zu Isoform 1 weniger effizient.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:18854315
• Tryptase alpha/beta-1 wird aus Zellen sezerniert, was ihrer Rolle als extrazellulärer Mediator nach der Mastzellenaktivierung entspricht.
• Isoformen zeigen unterschiedliche Gewebeverteilungen: Beide werden in Lunge, Magen, Milz, Herz und Haut gefunden (wobei Isoform 1 überwiegt), während Isoform 2 zusätzlich in Aorta, Milz und Brusttumoren nachgewiesen wurde, insbesondere in Endothelzellen perivaskulärer Regionen und der Tumorvaskulatur, mit minimaler Expression auf Proteinebene in Mastzellen.
• Das Protein ist posttranslational durch Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung modifiziert und wird als Zymogen mit einem spaltbaren Signalpeptid synthetisiert. Es unterliegt dem alternativen Spleißen, was zu mehreren Isoformen führt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 30–275 von humanem TPSB2 (reife Tryptase ohne das Signalpeptid), was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl Pro- als auch aktive Formen erkennen kann. Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 31 kDa, aber Glykosylierung kann die scheinbare Masse erhöhen; erwägen Sie die Verwendung von Entglykosylierungsenzymen, wenn eine Verschiebung beobachtet wird.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) ist eine starke Färbung in mastzellreichen Geweben wie Haut, Lunge und gastrointestinaler Mukosa zu erwarten. Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. wärmeinduzierte Epitop-Retrieval) werden empfohlen, und geeignete Isotyp-Kontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper für Capture oder Detection verwendet werden; titrieren Sie den Antikörper und validieren Sie die Leistung mit rekombinanten Tryptase-Standards oder Mastzelllysataten, um die Spezifität sicherzustellen.

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