Anti-MAPK1/MAPK3 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MAPK1/MAPK3

• MAPK1 (ERK2, p42-MAPK) und MAPK3 (ERK1, p44-MAPK) sind die zwei prototypischen mitogenaktivierten Proteinkinasen (MAPKs), die den Kern der konservierten MAPK/ERK-Signalkaskade bilden.
• Nach Aktivierung phosphorylieren MAPK1/3 ein breites Spektrum an nukleären und cytoplasmatischen Substraten – darunter Transkriptionsfaktoren (z. B. ELK1, FOS), Zytoskelettproteine und andere Kinasen – um Zellwachstum, Proliferation, Differenzierung, Adhäsion und Überleben zu regulieren.
• MAPK1 phosphoryliert GLI1 spezifisch als Reaktion auf die Smoothened-Signalgebung, fördert die Dissoziation von GLI1 von SUFU und dessen nukleäre Translokation, wodurch der Hedgehog-Weg positiv reguliert wird. Verwandte Referenzen: PMID:35831023
• Unter hypoxischen Bedingungen phosphoryliert MAPK1 die Phosphoglyceratkinase PGK1, lenkt sie zu den Mitochondrien und unterdrückt die Produktion von Acetyl-Coenzym A aus Pyruvat. Verwandte Referenzen: PMID:26942675
• Die Kinase shuttlelt zwischen Cytoplasma und Kern und lokalisiert an Fokalkontakten, Caveolae, dem Zytoskelett (einschließlich Zentrosomen und Spindeln) und membranassoziierten Strukturen – abhängig vom zellulären Kontext.
• Die MAPK1-Kinaseaktivität wird streng durch Phosphorylierungs- und Dephosphorylierungsereignisse reguliert; sie dient als Knotenpunkt für die Signalausbreitung und phosphoryliert selbst nachgeschaltete Kinasen wie RSK, MSK, MNK und MAPKAP-Kinasen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen aktivierende Phosphorylierung an Thr- und Tyr-Resten in der Aktivierungsschleife, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, Lokalisation und Interaktionspartner modulieren.
• Knockout oder abweichende Expression und Signalgebung von MAPK1/3 werden mit Krebs, neurologischen Erkrankungen und anderen Krankheiten in Verbindung gebracht; die Kinase ist Ziel von Wirt-Virus-Interaktionen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser kaninchen-polyclonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erhoben, das den Aminosäuren 200-300 von menschlichem MAPK1 und MAPK3 (ERK2 und ERK1) entspricht; es wird vorhergesagt, dass er beide Kinasen erkennt und im Western Blot aufgrund von Isoformen und Phospho-Formen mehrere Banden nachweisen kann.
• Für Western Blotting laden Sie 20-30 µg Gesamtproteinlysat und verwenden Sie geeignete Kontrollen (z. B. serumverarmte vs. wachstumsfaktorstimulierte Zellen), um die ERK-Aktivierung zu beobachten. Die erwarteten Molekulargewichte liegen im Bereich von 36 bis 43 kDa.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC fixieren Sie Zellen mit 4% Paraformaldehyd und permeabilisieren mit 0,1% Triton X-100; eine Inkubation des Primärantikörpers über Nacht bei 4°C wird empfohlen. Validieren Sie die Färbespezifität durch Peptidblockierung oder siRNA-Knockdown.
• Für ELISA kann dieser polyclonale Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz verwendet werden; optimale Beschichtungs- und Nachweisbedingungen sollten empirisch bestimmt werden. Ein passendes monoklonales Antikörperpaar kann Empfindlichkeit und Spezifität verbessern.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit MAPK1/MAPK3 von Maus und Ratte; führen Sie jedoch eine artspezifische Validierung in Ihrem experimentellen System durch, um Reaktivität und Signal-Rausch-Verhältnis zu bestätigen.

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