Polyklonaler Anti-MAdCAM-1-Antikörper für WB, ELISA – Q61826

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MAdCAM-1

• MAdCAM-1 (mukosales Addressin-Zelladhäsionsmolekül 1) ist ein von mukosalen Venolen exprimierter Zelladhäsionsrezeptor, der eine zentrale Rolle bei der Steuerung des Lymphozytenverkehrs in mukosale Gewebe wie Peyer-Plaques und die intestinale Lamina propria spielt.
• Es bindet sowohl Integrin alpha-4/beta-7 als auch L-Selektin und reguliert dadurch den Durchtritt und die Retention von Leukozyten in mukosalen Bereichen.
• Aufgrund alternativen Spleißens existieren zwei Isoformen; beide binden an Integrin alpha-4/beta-7, jedoch fehlt Isoform 2 die mucinähnliche Domäne. Sie könnte auf eine Verstärkung der integrinabhängigen Adhäsion unabhängig von der L-Selektin-Bindung spezialisiert sein.
• Das Protein ist in der Membran lokalisiert und wird stark auf hochendothelialen Venolen (HEV) organisierter intestinaler lymphatischer Gewebe exprimiert, mit geringeren Mengen in Milz, peripheren Lymphknoten und laktierender Milchdrüse.
• MAdCAM-1 wird in Leber, Niere, Lunge oder normalem Gehirn nicht nachgewiesen, jedoch in chronisch entzündeten Geweben, einschließlich entzündeter Bauchspeicheldrüse und Endothelzellen von Hirnendotheliomen, hochreguliert.
• Es gehört zur Immunglobulin-Superfamilie und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die zu seinen Adhäsionsfunktionen beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 22–109 des murinen MAdCAM-1 und umfasst einen Teil der extrazellulären Domäne; das Epitop kann in nativer oder denaturierter Form exponiert sein.
• Für den Western Blot sollten Proteinextrakte aus intestinalen lymphatischen Geweben oder der Milz von Mäusen verwendet werden, in denen MAdCAM-1 angereichert ist; eine Bande bei etwa 43 kDa wird erwartet.
• Da der Antikörper polyklonal ist und mehrere Isoformen existieren, können zusätzliche Banden unterschiedlicher Größe detektiert werden; validieren Sie die Isoformspezifität in Ihrem Probensystem.
• Für den ELISA können rekombinantes MAdCAM-1-Protein oder Gewebelysate verwendet werden; geeignete Kontrollen sollten eingeschlossen werden, um die Bindungsspezifität zu bestätigen.
• Optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers abhängig vom Nachweissystem und der Probenmenge; ein typischer Ausgangsbereich für WB ist 1:500–1:2000.

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