Anti-MAD2/MAD2L1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13257

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MAD2/MAD2L1 Funktion und Lokalisierung

• MAD2/MAD2L1 (Mitotic arrest deficient 2-like protein 1), auch bekannt als MAD2A oder HSMAD2, ist eine Schlüsselkomponente des mitotischen Checkpoint-Komplexes (MCC), der eine genaue Chromosomensegregation während der Zellteilung sicherstellt. Verwandte Referenzen: PMID:10700282, PMID:11804586, PMID:15024386
• Der MCC, bestehend aus MAD2L1, CDC20, BUB1B/BUBR1 und BUB3, bindet an und hemmt das Anaphase-promoting complex/cyclosome (APC/C) und verzögert damit den Übergang von der Metaphase zur Anaphase, bis alle Chromosomen richtig an der mitotischen Spindel befestigt sind. Verwandte Referenzen: PMID:15020684, PMID:27509861
• Nach Erfüllung des Spindel-Assembly-Checkpoints rekrutiert der MCC-APC/C-Komplex das E2-Enzym UBCH10, was die Auto-Ubiquitinierung und den Abbau von CDC20 auslöst, wodurch das APC/C für den Eintritt in die Anaphase reaktiviert wird. Verwandte Referenzen: PMID:27509861
• MAD2L1 existiert in zwei konformationellen Zuständen: offen (O-MAD2) und geschlossen (C-MAD2). An nicht befestigten Kinetochoren bildet C-MAD2 einen Heterotetramer mit MAD1L1, der O-MAD2-Moleküle rekrutiert und ihre Umwandlung in die aktive C-MAD2-Form katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:29162720
• Das Protein lokalisiert sich im Zellkern, spezifisch an den Kinetochoren auf kondensierten Chromosomen, sowie im Zytoplasma und an den Spindelpolen während der Mitose.
• Schlüsselwörter, die mit MAD2L1 verbunden sind, umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und alternatives Spleißen, was auf posttranslationale Modifikationen und Isoform-Vielfalt hindeutet, die seine Checkpoint-Funktionen regulieren könnten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid generiert, das die Aminosäuren 70-150 von humanem MAD2L1 abdeckt. Diese Region kann in beiden offenen und geschlossenen Konformationen zugänglich sein, aber eine empirische Validierung in relevanten Probensystemen wird empfohlen.
• Geeignete Anwendungen umfassen Western Blotting (WB) und ELISA. Für WB sollten Sie eine Ladungskontrolle verwenden, die nicht zellzyklusreguliert ist, und die Blockierungsbedingungen optimieren, um den Hintergrund zu minimieren.
• Angesichts der dynamischen Lokalisierung und konformationellen Änderungen von MAD2L1 während der Mitose können Zellsynchronisationstechniken den Nachweis in spezifischen Zellzyklusphasen verbessern.

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