Anti-MAD1/MAD1L1-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q9Y6D9

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MAD1/MAD1L1

• MAD1/MAD1L1 (MAD1L1-Gen) kodiert das mitotische Spindelassemblierungs-Checkpoint-Protein MAD1, auch bekannt als HsMAD1, hMAD1 und Tax-bindendes Protein 181.
• Es ist eine Kernkomponente des Spindelassemblierungs-Checkpoints (SAC), der den Beginn der Anaphase verzögert, bis alle Chromosomen ordnungsgemäß an der Metaphasenplatte ausgerichtet sind. Zugehörige Referenzen: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• An nicht angehefteten Kinetochoren bildet MAD1 einen heterotetrameren Komplex mit geschlossenem MAD2L1 (C-MAD2) und katalysiert die Umwandlung von offenem MAD2L1 (O-MAD2) in C-MAD2, wodurch das „Anaphase-warten“-Signal verstärkt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:29162720
• MAD1 kann MAD2L1 auch im Zytoplasma sequestrieren, wodurch die SAC-Funktion beeinträchtigt und die chromosomale Instabilität gefördert wird, insbesondere bei hepatozellulären Karzinomen.
• Subzelluläre Lokalisation: Im Verlauf des Zellzyklus lokalisiert sich MAD1 dynamisch im Zellkern, am Kinetochor, an der Kernhülle, am Zentrosom, an der mitotischen Spindel und an den Spindelpolen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation (ISGylierung), die seine Checkpoint-Funktionen regulieren können.
• Auf Proteinebene wird MAD1 in hepatozellulären Karzinomen und Hepatom-Zelllinien exprimiert, wodurch ein Zusammenhang mit der Biologie von Leberkrebs besteht.
• MAD1 gehört zur MAD-Familie (mitotic arrest deficient), die für die Kontrolle des mitotischen Checkpoints essenziell ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 50–150 des humanen MAD1 umfasst. Überprüfen Sie die Antikörperspezifität mithilfe von Peptidkompetitionsassays oder genetischen Knockdown-/Knockout-Kontrollen im relevanten Zellsystem.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von MAD1 beträgt etwa 83 kDa; im Western Blot sollte eine Bande nahe dieser Größe erwartet werden. Erwägen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen und geeigneter Ladekontrollen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und die Kombination mit passenden Antikörpern für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA.
• Eine Kreuzreaktivität mit Mensch und Maus wurde berichtet; validieren Sie den Antikörper bei Bedarf in weiteren Spezies.

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