Anti-LRRK2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q5S007

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LRRK2-Funktion und -Lokalisierung

• LRRK2 ist eine große Multidomänen-Serin/Threonin-Proteinkinase, die ein breites Spektrum an Substraten phosphoryliert und kritische Rollen bei neuronaler Plastizität, angeborener Immunität, Autophagie und Vesikeltransport spielt. Verwandte Referenzen: PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• Es wirkt als Schlüsselregulator von RAB-GTPasen, steuert deren GTP/GDP-Austausch und Proteininteraktionen durch Phosphorylierung mehrerer RABs, einschließlich RAB3A-D, RAB5A-C, RAB8A/B, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35 und RAB43. Verwandte Referenzen: PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718 PMID:29125462

• LRRK2 reguliert die primäre Ziliogenese und die Sonic-Hedgehog(SHH)-Signalgebung im Gehirn über RAB8A- und RAB10-Phosphorylierung und vermittelt zusammen mit RAB29 den Retromer-abhängigen retrograden Transport zwischen Lysosomen und dem Golgi-Apparat. Verwandte Referenzen: PMID:23395371 PMID:29125462 PMID:30398148

• Über die Kinaseaktivität hinaus besitzt LRRK2 eine GTPase-Funktion durch seine Roc-Domäne, die die Kinaseaktivität reziprok reguliert, und wird von RAB29 zu überlasteten Lysosomen rekrutiert, um die Freisetzung des Lysosomeninhalts zu fördern und die Vergrößerung über EHBP1/EHBP1L1-Effektoren zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:18230735 PMID:26824392 PMID:28720718 PMID:30209220 PMID:38227290

• LRRK2 reguliert die Autophagie positiv über einen kalziumabhängigen CaMKK/AMPK-Signalweg, der die Aktivierung des NAADP-Rezeptors, einen Anstieg des lysosomalen pH-Werts und die Kalziumfreisetzung beinhaltet. Verwandte Referenzen: PMID:22012985

• Es moduliert die angeborene Immunität durch Verstärkung der RIPK2-Aktivierung stromabwärts von NOD1/NOD2 und hemmt unabhängig von der Kinaseaktivität den proteasomalen Abbau von MAPT (Tau), was dessen Oligomerisierung und Sekretion fördert. Verwandte Referenzen: PMID:27830463 PMID:26014385

• LRRK2 lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten, einschließlich zytoplasmatischer Vesikel, Golgi, ER, Mitochondrien, Endosomen, Lysosomen und synaptischer Vesikel; es wird weitgehend im Gehirn, Herz, Leber und anderen Geweben exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 750–910 von humanem LRRK2, einer Region N-terminal der Leucin-reichen Repeat-Domäne; der resultierende polyklonale Antikörper kann mehrere Epitope erkennen und könnte für den Nachweis verschiedener Isoformen oder Spaltprodukte geeignet sein.
• Für Western Blot beachten Sie das hohe Molekulargewicht von LRRK2 (~286 kDa); verwenden Sie ein Polyacrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und optimieren Sie die Transferbedingungen (z. B. verlängerter Nass-Transfer), um ein effizientes Blotten sicherzustellen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Methoden (hitzeinduziert oder enzymatisch) die Detektion verbessern; validieren Sie den Antikörper unter Ihren spezifischen Gewebe- und Fixierungsbedingungen.
• Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) erfordert möglicherweise Permeabilisierung und sorgfältige Fixierung, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten; Co-Färbung mit Organellenmarkern kann helfen, Lokalisierungsmuster zu bestätigen.
• ELISA: Der Antikörper kann als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; ziehen Sie die Paarung mit einem validierten LRRK2-Antikörperklon für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA in Betracht.

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