Anti-LRP2 (Megalin) Kaninchen-polyclonale Antikörper für WB, IHC-P, IF-P - P98164

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von LRP2

• LRP2 kodiert für Megalin (gp330), ein ~522 kDa großes Transmembranglykoprotein vom Typ I, das zur Familie der LDL-Rezeptoren gehört. Es fungiert als Multiligand-Endozytoserezeptor, das hauptsächlich an den apikalen Oberflächen absorptiver Epithelien exprimiert wird.
• In der Niere vermittelt Megalin die tubuläre Aufnahme und Clearance verschiedener Substrate, darunter Metallothionein-gebundene Schwermetalle, antiapoptotisches Survivin, 25-Hydroxyvitamin D3, den Vitamin D3-Transporter GC/DBP und Myoglobin, und trägt so zur renalen Reabsorption und Homöostase bei. Verwandte Referenzen: PMID:15126248 PMID:23825075
• Es bildet mit Cubilin (CUBN) einen Endozytosekomplex, der die Wiederaufnahme gefilterter Proteine wie Albumin, Vitaminträger und Lipoproteine vermittelt und so den Urinverlust verhindert.
• Im zentralen Nervensystem reguliert Megalin die Neurogenese und Gehirnentwicklung, indem es die Endozytose von Sonic Hedgehog (SHH), Leptin und BMP4 vermittelt, und erleichtert die Transzytose von SHH und Leptin über die Blut-Hirn-Schranke.
• Subzellulär lokalisiert sich LRP2 an Coated Pits, apikalen Zellmembranen, Endosomenlumina und neuronalen Fortsätzen (Axonen und Dendriten), wo es die Clathrin-vermittelte Internalisierung und den Trafficking orchestriert.
• Die höchste Gewebsverteilung findet sich in den proximalen Nierentubuli, plazentaren Cytotrophoblasten und dem Plexus-choroideus-Epithel, mit Funktionen bei der Embryonalentwicklung, Vitamin- und Ionenhomöostase sowie dem Gehör. Verwandte Referenzen: PMID:27798286
• Posttranslationale Modifikationen umfassen umfangreiche Glykosylierung, Disulfidbindungen in EGF-ähnlichen Wiederholungen und Phosphorylierung, die die Ligandenbindung und das Rezeptorrecycling regulieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen zytoplasmatischen Domäne (aa 4446‑4655), die über Spezies hinweg hochkonserviert ist, was wahrscheinlich zur Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte beiträgt. Überprüfen Sie die Sequenzhomologie in Ihrer Zielspezies.
• Verwenden Sie für Western Blot ein Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6% SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten, um das 522 kDa große Volllängenprotein aufzutrennen. Validieren Sie die Bandspezifität mit positiven Kontrolllysaten aus Nieren- oder Hirngewebe.
• Aufgrund der starken Glykosylierung kann das beobachtete Molekulargewicht nach oben verschoben sein; erwägen Sie eine enzymatische Deglykosylierung, wenn eine genaue Größenbestimmung erforderlich ist.
• Optimieren Sie bei IHC-P und IF-P die Antigenretrieval und schließen Sie eine Positivkontrolle wie menschliche Nierenschnitte ein. Das Signal kann membranassoziiert oder punktförmig in endozytischen Vesikeln vorliegen.
• Bei ELISA sorgt die polyclonale Natur für hohe Avidität; validieren Sie mit rekombinantem LRP2 oder Zelllysaten, um die Empfindlichkeit zu bestätigen.

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