Anti-LOXL2-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y4K0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LOXL2-Funktion und -Lokalisierung

• LOXL2 (Lysyl-Oxidase-Homolog 2) ist ein kupferabhängiges Aminoxidase, das die oxidative Desaminierung von Lysinresten vermittelt. Es wirkt als transkriptioneller Corepressor durch spezifische Desaminierung der trimethylierten 'Lys-4' von Histon H3 (H3K4me3) und desaminiert auch TAF10, um es von den Promotoren zu lösen, wodurch die TFIID-abhängige Transkription gehemmt wird. Verwandte Referenzen: PMID:27735137 PMID:25959397
• Es zeigt eine strikte Substratspezifität, ist nur an H3K4me3 aktiv und nicht an H3K9me3, H3K27me3 oder teilweise methyliertem H3K4, was seine präzise Rolle bei der epigenetischen transkriptionellen Regulation hervorhebt. Verwandte Referenzen: PMID:27735137
• LOXL2 ist ein Schlüsselmediator des epithelial-mesenchymalen Übergangs (EMT). Es interagiert mit SNAI1, um die Expression von E-Cadherin (CDH1) zu unterdrücken, wahrscheinlich durch die Desaminierung von Histon H3. LOXL2 bindet auch an endoplasmatisches Retikulum HSPA5 und aktiviert den IRE1-XBP1-Weg, um den EMT voranzutreiben. Verwandte Referenzen: PMID:16096638 PMID:24414204 PMID:27735137 PMID:28332555
• Unter hypoxischen Bedingungen unterdrückt LOXL2 E-Cadherin und trägt zur Aggressivität von Tumoren bei. Es ist in verschiedenen Krebsarten häufig hochreguliert, was auf eine Rolle beim Tumorfortschritt hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:20026874
• Sekretiertes LOXL2 funktioniert in der extrazellulären Matrix und vernetzt Kollagen und Elastin durch oxidative Desaminierung von peptidylischen Lysinen. Es reguliert auch die Sprossangiogenese über Kollagen-IV-Gerüste. Verwandte Referenzen: PMID:20306300 PMID:21835952
• Das Enzym enthält einen Lysyl-Tyrosylquinon (LTQ)-Kofaktor, der für seine katalytische Aktivität essentiell ist und durch posttranslationale Vernetzung von Lysin- und Tyrosinresten gebildet wird. Es bindet auch Kupfer und verfügt über mehrere Disulfidbindungen und Glykosylierungsstellen.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist dual: LOXL2 wird in die extrazelluläre Matrix und die Basalmembran sezerniert, befindet sich aber auch im Zellkern, auf den Chromosomen und im endoplasmatischen Retikulum, was seinen transkriptionellen Regulations- und extrazellulären Funktionen entspricht.
• LOXL2 ist breit exprimiert, mit den höchsten Werten in reproduktiven Geweben (Plazenta, Uterus, Prostata). Die Expression ist ist in Schichten der Ösophagus-Epithels und in zahlreichen Karzinomen erhöht, was es zu einem potenziellen Biomarker macht. Verwandte Referenzen: PMID:10212285 PMID:22204712

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 51–290 und umfasst einen Teil der LOX-katalytischen Domäne. Diese Region kann sowohl vollständige als auch trunkierte LOXL2-Isoformen erkennen; validieren Sie die Antikörperspezifität in Ihrem Zielsystem.
• Für den Western Blot (WB) bereiten Sie Lysate mit Protease/Phosphatase-Inhibitoren vor und verwenden Sie eine Ladungskontrolle, die mit dem erwarteten 87 kDa-Band kompatibel ist. Bestätigen Sie die Reaktivität mit humanen, murinen und Ratten-Proben wie aufgeführt.
• In ELISA-Anwendungen sollten Sie einen Detektionsantikörper wählen, der ein nicht überlappendes LOXL2-Epitop für Sandwich-Assays erkennt. Optimieren Sie Beschichtung, Blockierung und Detektionsbedingungen empirisch.
• Da LOXL2 sowohl in nukleären als auch in sekretierten Kompartimenten lokalisiert ist, wählen Sie Lysepuffer und Fraktionierungsmethoden, die für Ihren Probentyp geeignet sind, um eine Zielerholung sicherzustellen.

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