Kaninchen-monoklonaler Anti-LIS1-Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA – P43034

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LIS1

• Die Beta-Untereinheit der plättchenaktivierenden Faktor-Acetylhydrolase IB (LIS1, auch bekannt als PAFAH1B1, LIS-1, PAF-AH-45-kDa-Untereinheit) ist die regulatorische Beta-Untereinheit der zytosolischen PAF-Acetylhydrolase vom Typ I (PAF-AH (I)), eines Enzyms, das den plättchenaktivierenden Faktor (PAF) durch Hydrolyse seiner Acetylgruppe inaktiviert.
• LIS1 reguliert das zum Minusende gerichtete Mikrotubuli-Motorprotein Dynein positiv, verstärkt das Dynein-vermittelte Gleiten von Mikrotubuli und dirigiert Dynein zu den Plusenden der Mikrotubuli. LIS1 ist für die Rekrutierung von Dynein an die Plusenden der Mikrotubuli und an BICD2-gebundene Fracht erforderlich. Zugehörige Referenz: PMID:22956769
• Für die neuronale Migration während der Gehirnentwicklung essenziell: LIS1 reguliert die Nukleokinese, den Prozess, bei dem sich der Zellkern in den vorderen Fortsatz migrierender Neuronen verlagert, und ist für die ordnungsgemäße Aktivierung von Rho-GTPasen sowie die Aktinpolymerisation an der Vorderkante der Neuronen erforderlich.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zytoskelett, Zentrosom, Spindel und Kernmembran und spiegelt seine Funktionen bei mikrotubuliabhängigen Prozessen wider, etwa bei der Aufrechterhaltung der Golgi-Integrität und der Kopplung von Zellkern und Zentrosom.
• In frontalen und okzipitalen Bereichen des Gehirns relativ ubiquitär exprimiert, was mit seiner zentralen Rolle bei der Neuroentwicklung übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, können die Funktion von LIS1 regulieren; Mutationen im Gen verursachen Lissenzephalie, eine schwere Fehlbildung des Gehirns.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–100 des humanen LIS1 (P43034) entspricht. Im Western Blot wird eine Bande bei etwa 47 kDa erwartet. Die Spezifität der Bande sollte mithilfe geeigneter Kontrollen validiert werden, beispielsweise durch Lysate aus Zellen mit Knockdown oder Knockout.
• Dieser Antikörper wurde in WB, IF/ICC, IP und ELISA getestet. Für die Immunpräzipitation sollten Antikörperkonzentration und Inkubationsbedingungen optimiert werden. Für die Immunfluoreszenz sollten Permeabilisierungs- und Fixierungsmethoden für die jeweilige Probe evaluiert werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, wodurch sich der Antikörper für Studien mit diesen Modellorganismen eignet. Bei der Interpretation der Ergebnisse sollte jedoch ein Sequenzvergleich der Immunogenregion mit LIS1 von Maus und Ratte berücksichtigt werden.

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