Anti-LIN28B Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IP, IHC-P, ELISA – Q6ZN17

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LIN28B

• LIN28B wirkt als Suppressor der microRNA-Biogenese und zielt spezifisch auf miRNAs der let-7-Familie ab. Es bindet primäre let-7-Transkripte (pri-let-7) und sequestriert sie im Nukleolus, wodurch sie vor dem Mikroprozessorkomplex abgeschirmt und an ihrer Reifung gehindert werden (PubMed:22118463).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22118463
• Diese Repression der let-7-Expression ist entscheidend für die normale Entwicklung und hilft, die Pluripotenz von embryonalen Stammzellen durch Hemmung von Differenzierungssignalen aufrechtzuerhalten.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22118463
• Bei Überexpression kann LIN28B die ZCCHC11/TUT4-Uridylyltransferase an pre-let-7-Transkripte rekrutieren, was zu einer terminalen Uridylierung und dem Abbau der miRNA-Vorläufer führt (PubMed:19703396).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19703396
• Das Protein enthält zwei Zinkfingerdomänen und eine Kälteschockdomäne, wodurch es als RNA-bindendes Protein klassifiziert wird, das an RNA-vermittelter Genstilllegung beteiligt ist.
• LIN28B ist überwiegend im Nukleolus und Zellkern lokalisiert, kann aber auch zum Zytoplasma wandern, was für seine Funktion bei der miRNA-Prozessierung essenziell ist.
• Gewebeexpressionsanalysen zeigen hohe Spiegel in der Plazenta, mit geringerer Expression in Hoden und fötaler Leber. Bei hepatozellulärem Karzinom werden unterschiedliche Expressionsmuster der Isoformen beobachtet.
• Das Gen durchläuft alternatives Spleißen und erzeugt mindestens zwei Isoformen – Isoform 1 fördert das Zellwachstum, Isoform 2 nicht, was auf eine funktionelle Divergenz hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung, das Protein ist als Proteomik-Marker identifiziert; es verfügt außerdem über einen Eintrag zur 3D-Struktur.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen dieses Antikörpers deckt die Aminosäuren 1-163 von humanem LIN28B ab und zielt auf die N-terminale Region ab. Diese Region enthält die Kälteschockdomäne und ist über alle beschriebenen Isoformen hinweg konserviert, sodass potenziell sowohl Isoform 1 als auch Isoform 2 nachgewiesen werden können. Dennoch wird eine Validierung im spezifischen Probensystem empfohlen.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande von etwa 27 kDa zu erwarten. Achten Sie auf eine korrekte Proteinextraktion, da LIN28B überwiegend im Zellkern und Nukleolus vorkommt; erwägen Sie die Verwendung von RIPA-Puffer oder KernExtraktionskits, um die Löslichkeit zu verbessern.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) ist mit einem nukleären und nukleolären Färbemuster zu rechnen. Verwenden Sie geeignete Methoden zur Antigenrettung und validieren Sie die Färbung mit Positivkontrollgeweben wie Plazenta oder Krebgeweben, in denen LIN28B hoch exprimiert ist.
• Für die Immunpräzipitation (IP) bietet das Format des Kaninchen-monoklonalen Antikörpers hohe Spezifität und Affinität. Optimieren Sie die Antikörperkonzentration und Inkubationsbedingungen für die verwendete Zelllinie oder den Gewebslysat.
• Dieser Antikörper ist für humane Proben validiert; Kreuzreaktivität mit anderen Arten wurde nicht beschrieben. Forschende sollten die Reaktivität überprüfen, wenn nicht-menschliche Proben verwendet werden.

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