Anti-LIN28A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H9Z2

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: LIN28A-Funktion und -Lokalisierung

• LIN28A (Protein lin-28 Homolog A, auch bekannt als ZCCHC1) ist ein konserviertes RNA-bindendes Protein, das durch zwei Cold-Shock-Domänen und zwei CCHC-Zinkfinger-Motive charakterisiert ist, was es in die Familie der Zinkfingerproteine einordnet.
• Es fungiert als Suppressor der microRNA-Biogenese, indem es spezifisch an pre-let-7 miRNAs und andere pre-miRNAs an einem 5'-GGAG-3'-Terminalloop-Motiv bindet und dadurch die Uridylyltransferasen TUT4 und TUT7 rekrutiert. Die Uridylierung löst den Abbau aus und verhindert die Verarbeitung durch Dicer, was für die Aufrechterhaltung der Pluripotenz entscheidend ist (PubMed:18951094, PubMed:19703396, PubMed:22118463). Verwandte Referenzen: PMID:18951094 PMID:19703396 PMID:22118463
• LIN28A wirkt als translationsverstärkender Faktor, indem es spezifische mRNAs (z. B. IGF2, MYOD1) zu Polysomen treibt, die Proteinsynthese und die mRNA-Stabilität erhöht, was für die Skelettmuskel-Differenzierung wesentlich ist (PubMed:21247876). Verwandte Referenzen: PMID:21247876
• Es lokalisiert sich in mehrere subzelluläre Kompartimente: Zytoplasma, raues endoplasmatisches Retikulum, P-Bodies, Stress-Granula und den Nukleolus, was seine vielfältigen Rollen im RNA-Stoffwechsel widerspiegelt.
• LIN28A ist hochexprimiert in embryonalen Stammzellen, Plazenta und Hoden und häufig hochreguliert in HER2-überexprimierenden Brusttumoren, was es mit Stammzelleigenschaften und Onkogenese verbindet.
• Posttranslationale Modifikationen von LIN28A umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Proteininteraktionen regulieren können.
• Darüber hinaus bindet und verstärkt LIN28A die Translation von mRNAs, die für metabolische Enzyme wie PFKP, PDHA1 und SDHA kodieren, wodurch die Glykolyse und oxidative Phosphorylierung erhöht werden, um die Gewebereparatur zu unterstützen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100–209 von menschlichem LIN28A zugeordnet ist. Aufgrund der hohen Sequenzkonservierung ist eine Kreuzreaktivität mit murinem LIN28A zu erwarten, was mit der dokumentierten Reaktivität des Produkts übereinstimmt.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~23 kDa; verwenden Sie geeignete Gelkonzentrationen (z. B. 12–15 % SDS‑PAGE) und schließen Sie relevante Ladungskontrollen ein.
• Für Immunhistochemie (IHC‑P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) validieren Sie den Antikörper in LIN28A‑exprimierenden Geweben oder Zelllinien (z. B. embryonale Stammzellen, Hoden). Die Bedingungen für die Antigen-Retrieval und die Antikörperverdünnungen müssen empirisch optimiert werden.
• Aufgrund seiner Mehrfachlokalisierung kann IF/ICC zytoplasmatische und nukleoläre Färbemuster zeigen; eine Co-Färbung mit Organellmarkern wird empfohlen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz für quantitative Assays überprüft werden; erwägen Sie die Einbeziehung positiver und negativer Kontrollen in jedem Experiment.

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