Anti-LILRB1/CD85j/ILT2 monoklonaler Antikörper für WB, FC, ELISA - Q8NHL6

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: LILRB1-Funktion und -Lokalisierung

• LILRB1 (auch bekannt als ILT2, LIR1, MIR7, CD85J) ist ein Mitglied der Unterkategorie B der Leukozyten-Immunglobulin-ähnlichen Rezeptoren. Es enthält Ig-ähnliche Domänen und zytoplasmatische ITIM-Motive, die hemmende Signalwege vermitteln.
• Es fungiert als Rezeptor für ein breites Spektrum klassischer und nicht-klassischer MHC-Klasse-I-Moleküle, einschließlich HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-G und HLA-F, und erkennt auch das HCMV-Immunevasin UL18. Verwandte Referenzen: PMID:16455647, PMID:28636952
• Die Bindung von Liganden auf NK-Zellen und T-Zellen hemmt die zelluläre Zytotoxizität und schützt Zielzellen vor der Lyse; auf B-Zellen bewirkt sie eine Umprogrammierung hin zu einem immunsuppressiven Phänotyp. Verwandte Referenzen: PMID:9285411, PMID:9842885, PMID:24453251
• LILRB1 interagiert mit peptidgebundener HLA-G, was zur Sekretion wachstumsfördernder Faktoren durch deziduale NK-Zellen führt und zur mütterlich-fetalen Toleranz beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:16455647, PMID:19304799, PMID:29262349
• Der Rezeptor wird vorwiegend auf der Zellmembran exprimiert, aber eine lösliche, sezernierte Isoform existiert; er ist stark exprimiert in B-Zellen, Monozyten, verschiedenen dendritischen Zellsubseten, dezidualen Makrophagen und dezidualen NK-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:20448110, PMID:24453251, PMID:9285411, PMID:9842885, PMID:19304799, PMID:29262349
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung von ITIM-Motiven (Rekrutierung der Phosphatasen SHP-1 und SHP-2) und N-verknüpfte Glykosylierung; das Protein weist Immunglobulin-Domänen, Disulfidbrücken und alternatives Spleißen auf.
• Es spielt eine Schlüsselrolle bei der Immun evasion, sowohl bei viralen Infektionen (durch UL18-Mimikry) als auch in der Tumor-Mikroumgebung, wo eine HLA-G-Überexpression die antitumorale Immunität unterdrückt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem rekombinanten humanen LILRB1-Protein und zielt wahrscheinlich auf extrazelluläre Epitope ab; berücksichtigen Sie dies bei der Planung von Blockierungs- oder Kompetitionsassays.
• Für Western Blot (WB) beachten Sie, dass das Protein aufgrund unterschiedlicher Glykosylierung oder alternativen Spleißens bei mehreren Molekulargewichten (49 kDa, 70 kDa, 71 kDa) wandern kann; fügen Sie geeignete positive Kontrollen hinzu und passen Sie die Probenvorbereitung an, um alle Formen zu erfassen.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) verwenden Sie ein Protokoll zur Färbung der lebenden Zelloberfläche ohne Permeabilisierung, angesichts der nativen Zellmembran-Lokalisierung des Rezeptors; titrieren Sie den Antikörper, um den Hintergrund auf primären Immunzellen zu minimieren.
• ELISA-Anwendungen können eine Optimierung der Beschichtungs- und Detektionsbedingungen erfordern; die Verwendung eines passenden Paares mit einem Capture-Antikörper kann die Empfindlichkeit erhöhen, wenn ein Sandwich-ELISA entwickelt wird.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in Ihrem spezifischen biologischen Probensystem (z. B. PBMCs, Deziduagewebe, tumorinfiltrierende Lymphozyten) und erwägen Sie funktionelle Assays wie die Hemmung der Ligandenbindung oder die Messung der ITIM-Phosphorylierung.

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