Anti-LIF Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P09056

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LIF-Funktion und -Lokalisierung

• Der Leukämie-Inhibitionsfaktor (LIF), auch bekannt als Differenzierungs-stimulierender Faktor (D-Faktor), ist ein sezerniertes Zytokin.
• LIF entfaltet seine Wirkung durch Bindung an einen Rezeptorkomplex, der aus IL6ST/gp130 und LIFR besteht.
• Er reguliert kritisch die Selbsterneuerung, Differenzierung und das Überleben embryonaler Stammzellen (ESCs) und ist für die embryonale Implantation unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:1522892 PMID:16452727 PMID:26775702
• Bei Ligandenbindung heterodimerisiert LIFR mit IL6ST/gp130 und aktiviert JAK-Kinasen (JAK1, JAK2, TYK2), die Rezeptor-Tyrosinreste phosphorylieren, was zur Rekrutierung und Aktivierung von STAT3 (und STAT1) führt. Verwandte Referenzen: PMID:8921810
• Die LIF-Stimulation aktiviert auch die MAPK- und PI3K/AKT-Signalwege; Die PI3K-Aktivität ist für eine effiziente ESC-Selbsterneuerung erforderlich, und die ERK-Regulation ist in dieser Antwort funktionell wichtig. Verwandte Referenzen: PMID:15328362 PMID:9545305
• LIF induziert die Tyrosinphosphorylierung von PTPN11, das mit IL6ST/gp130-LIFR assoziiert ist und die p85-Untereinheit von PI3K rekrutiert, was die PI3K-AKT- und GRB2-RAS-MAPK-Signalisierung weiter fördert.
• Das reife Protein wird über ein gespaltenes N-terminales Signalpeptid sezerniert.
• LIF ist ein Glykoprotein mit Disulfidbrücken und gehört zum Referenzproteom.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 24–203 von murinem LIF und deckt das reife sezernierte Protein ab; Verwenden Sie es zum Nachweis von nativem LIF in Probensystemen wie murinen ESCs oder Uterusgewebe.
• Führen Sie für Western Blots Proben unter reduzierenden Bedingungen aus, um Disulfid-verknüpfte Formen aufzulösen; Ein rekombinantes LIF-Protein oder Lysat von LIF-exprimierenden Zellen kann als Positivkontrolle dienen.
• Im ELISA sollten Sie diesen polyklonalen Antikörper mit einem passenden monoklonalen oder einem anderen polyklonalen Antikörper als Capture/Detection-Paar kombinieren; Validieren Sie die Assay-Spezifität mit einem rekombinanten LIF-Standard.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper kann die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz variieren; Wir empfehlen, in jedem Experiment einen internen Referenzstandard einzubeziehen.
• Stellen Sie sicher, dass sekundäre Anti-Kaninchen-IgG-Konjugate mit Ihrem Detektionssystem kompatibel sind.

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