Anti-LGR5 Poliklonaler Antikörper für WB, FC, ELISA - O75473

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LGR5

• LGR5 (Leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5), auch bezeichnet als GPR49, GPR67, HG38, FEX oder GRP49, ist ein mehrpassiger Membranrezeptor, der durch leucinreiche Wiederholungen und eine 7-Transmembrandomäne gekennzeichnet ist.
• Es fungiert als Rezeptor für R-Spondine (RSPO1–4) und verstärkt die kanonische Wnt-Signalgebung. Nach Ligandenbindung assoziiert LGR5 mit phosphoryliertem LRP6 und Frizzled-Rezeptoren, um die Expression von Wnt-Zielgenen zu aktivieren, ohne heterotrimere G-Proteine zu binden.
• LGR5 ist ein gut etablierter Marker für adulte Stammzellen, insbesondere in der Kryptbasis des Darms und der Haarfollikelbulge, und ist essenziell für die Erhaltung und Entwicklung dieser epithelialen Stammzellpopulationen.
• Subzellulär lokalisiert sich LGR5 an der Zellmembran, im Golgi-Apparat und der Membran des trans-Golgi-Netzwerks.
• Die Gewebeexpression umfasst Skelettmuskulatur, Plazenta, Rückenmark und verschiedene Gehirnregionen. Im Gastrointestinaltrakt wird LGR5 spezifisch in Stammzellen an der Kryptbasis der Kolon- und Dünndarmschleimhaut exprimiert. Bei prämalignen Zuständen erstreckt sich seine Expression über die Kryptbasis hinaus, und es ist bei Ovarial-, Kolon- und Leberkrebs überexprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbindungen und Glykosylierung. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein enthält ein Signalpeptid für die Targeting in den Sekretionsweg.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid aus der C-terminalen Region (AS 480–580) des humanen LGR5. Bei der Western Blot (WB) sollten Sie die Detektion des Volllängenproteins bei dem vorhergesagten Molekulargewicht von ~100 kDa (berechnet 99.998 Da) unter reduzierenden Bedingungen überprüfen.
• Für die Durchflusszytometrie (FC): LGR5 ist ein Zelloberflächenrezeptor; verwenden Sie intakte, nicht permeabilisierte Zellen, um die Oberflächenexpression nachzuweisen. Bestätigen Sie die Färbung in Zelllinien oder primären Geweben mit bekannter LGR5-Expression (z. B. intestinale Organoide) und fügen Sie Isotypkontrollen hinzu.
• Bei ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Capture- oder Nachweisreagens verwendet werden. Die Kreuzreaktivität mit Maus-LGR5 ist nachgewiesen; dennoch wird eine Validierung im spezifischen Assayformat empfohlen.
• Peptidblockierung oder Knockout-Zelllinien können als Spezifitätskontrollen verwendet werden, um spezifische von unspezifischen Signalen in allen Anwendungen zu unterscheiden.

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