Anti-LGR4 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q9BXB1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LGR4-Funktion und -Lokalisierung

• LGR4 (Leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 4), auch bekannt als GPR48, ist ein Rezeptor für R-Spondine (RSPO1-4), der die kanonische Wnt-Signalgebung verstärkt.
• Die Bindung von R-Spondinen löst eine Assoziation mit phosphoryliertem LRP6 und Frizzled-Rezeptoren aus und aktiviert die Expression von Wnt-Zielgenen ohne die klassische Aktivierung heterotrimerer G-Proteine.
• Spielt eine kritische Rolle bei der Entwicklung von Leber, Niere, Darm, Knochen, Fortpflanzungstrakt und Auge; erforderlich für Spermatogenese, Erhaltung der intestinalen Stammzellen und Differenzierung der Paneth-Zellen.
• Reguliert die angeborene Immunität negativ, indem es die TLR2/TLR4-assoziierte Mustererkennung und die Produktion proinflammatorischer Zytokine hemmt.
• Beteiligt an der zirkadianen Regulation von Plasmaplipiden, teilweise durch die rhythmische Expression von MTTP.
• Erforderlich für die korrekte Entwicklung von GnRH-Neuronen, die die Freisetzung von Fortpflanzungshormonen steuern.
• Lokalisiert an der Zellmembran, exprimiert in mehreren steroidogenen Geweben (Plazenta, Eierstock, Hoden, Nebenniere) sowie im Rückenmark, Schilddrüse, Magen, Luftröhre, Herz, Bauchspeicheldrüse, Niere, Prostata und Milz.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrücken; gehört zur GPCR-Familie mit Leucin-reichen Wiederholungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) verwenden Sie reduzierende und denaturierende Bedingungen zum Nachweis von LGR4; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 104 kDa, aber durch Glykosylierung kann eine höhere scheinbare Masse auftreten. Validieren Sie mit einem Positivkontrollen-Lysat aus menschlichen, murinen oder rattengewebigen Proben, von denen bekannt ist, dass sie LGR4 exprimieren.
• Bei der Immunfluoreszenz an Paraffin-eingebetteten Schnitten (IF-P) kann eine Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer, hitzeinduziert) für eine optimale Antigenexposition erforderlich sein. Erwägen Sie eine Permeabilisierung mit Triton X-100 und eine Blockierung mit Serum, das der Wirtsspezies des Sekundärantikörpers entspricht.
• Aufgrund der polyklonalen Natur können Chargenschwankungen auftreten. Fügen Sie geeignete Negativkontrollen (z. B. Zelllinien mit niedriger oder fehlender LGR4-Expression) ein und bestätigen Sie die Spezifität durch Blockierung mit dem Immunogen.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper und verwenden ein geeignete Detektionssystem; die Kreuzreaktivität mit murinem und rattengem LGR4 ermöglicht die Entwicklung von assays über Artgrenzen hinweg.

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