Anti-Legumain (LGMN) Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q99538

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Legumain

• Legumain (LGMN), auch bekannt als Asparaginyl-Endopeptidase (AEP), ist eine lysosomale Cysteinprotease, die eine strikte Spezifität für die Hydrolyse von Asparaginylbindungen aufweist und unter sauren Bedingungen langsam Aspartylbindungen spalten kann. Verwandte Referenzen: PMID:23776206
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Prozessierung von Proteinen für die MHC-Klasse-II-Antigenpräsentation im lysosomalen/endosomalen System. Verwandte Referenzen: PMID:9872320
• Legumain ist auch an der MHC-Klasse-I-Antigenpräsentation in kreuzpräsentierenden dendritischen Zellen beteiligt, indem es die Spaltung und Reifung von Perforin-2 (MPEG1) vermittelt und die Antigentranslokation im Zytosol fördert (Ähnlichkeit).
• Erforderlich für die normale lysosomale Proteindegradation in proximalen Nierentubuli und für den Abbau des internalisierten EGFR, wodurch die Zellproliferation reguliert wird (Ähnlichkeit).
• Das Protein ist ubiquitär vorhanden, aber besonders reichlich in Niere, Herz und Plazenta.
• Subzellulär lokalisiert im Lysosom.
• Es enthält Disulfidbindungen, ist glykosyliert und wird als Zymogen synthetisiert, das eine proteolytische Aktivierung erfordert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 26–288 des menschlichen Legumain und deckt die reife Proteasedomäne ab; dieses Design unterstützt den Nachweis sowohl der Pro- als auch der aktiven Form.
• Für das Western Blotting beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht 49 kDa; beachten Sie, dass die Proform bei einem höheren Molekulargewicht wandern kann. Validieren Sie mit Positivkontrolllysaten aus Niere oder Herz.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Schritte erforderlich sein. Gewebe wie Niere oder Plazenta, die hohe Mengen an Legumain exprimieren, können als Positivkontrolle dienen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist ein punktiertes, lysosomales Färbemuster zu erwarten. Eine Kolokalisierung mit lysosomalen Markern wird empfohlen, um die Zielspezifität zu bestätigen.

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