Anti-Legumain (LGMN) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q99538

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Legumain-Funktion und -Lokalisierung

• Legumain, auch bekannt als Asparaginyl-Endopeptidase (AEP), ist eine Cystein-Protease mit strikter Spezifität für die Hydrolyse von Asparaginyl-Bindungen; unter sauren Bedingungen kann sie auch langsam Aspartyl-Bindungen spalten. Verwandte Referenzen: PMID:23776206
• Sie spielt eine kritische Rolle bei der Präsentation von Antigenen der MHC-Klasse II, indem sie Proteine im lysosomalen/endosomalen System verarbeitet. Verwandte Referenzen: PMID:9872320
• In kreuzpräsentierenden dendritischen Zellen vermittelt Legumain die Antigenpräsentation der MHC-Klasse I durch Spaltung und Reifung von Perforin-2 (MPEG1), was die Translokation von Antigenen in das Zytosol erleichtert.
• Legumain ist für die normale lysosomale Proteinabbau in den proximalen Tubuli der Niere sowie für den Abbau von internalisiertem EGFR erforderlich und reguliert so die Zellproliferation.
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend zu Lysosomen und ist ubiquitär exprimiert, mit der höchsten Häufigkeit in Niere, Herz und Plazenta.
• Legumain wird als Zymogen synthetisiert, unterliegt einer autoproteolytischen Aktivierung und existiert durch alternatives Spleißen in mehreren Isoformen; es enthält Disulfidbrücken und N-verknüpfte Glykosylierungsstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 26-288) entspricht der Legumain-Proform ohne Signalpeptid, sodass der Antikörper sowohl die Proform (~49 kDa) als auch das reife Enzym (~42 kDa) im Western Blot erkennen kann.
• Für den WB sollten Sie eine ausreichende Proteinmenge auftragen und geeignete Blockierungsmittel verwenden, da Legumain aufgrund der Verarbeitung oder Glykosylierungsunterschiede als Doppelband erscheinen kann.
• Bei IF-P und IHC-P ist mit einer punktförmigen, lysosomalen Färbung zu rechnen; fügen Sie Organellmarker hinzu, um die Lokalisierung zu verifizieren.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem und rattigem Legumain, was vergleichende Studien über Speziesgrenzen hinweg ermöglicht; validieren Sie ihn jedoch in Ihrem Probensystem, da die Expressionsniveaus und die Verarbeitung variieren können.

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