Anti-Legumain (LGMN) monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q99538

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Legumain (LGMN)

• Legumain, auch bekannt als Asparaginyl-Endopeptidase (AEP) oder Protease Cystein 1 (PRSC1), ist eine Cysteinprotease, die vom LGMN-Gen kodiert wird.
• Es weist eine strenge Spezifität für die Hydrolyse von Asparaginylbindungen auf und kann auch Aspartylbindungen langsam spalten, insbesondere unter sauren Bedingungen. Verwandte Referenzen: PMID:23776206
• Legumain ist an der Prozessierung von Proteinen für die MHC-Klasse-II-Antigenpräsentation im lysosomalen/endosomalen System beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:9872320
• In kreuzpräsentierenden dendritischen Zellen spielt es eine Rolle bei der MHC-Klasse-I-Antigenpräsentation, indem es die Spaltung und Reifung von Perforin-2 (MPEG1) vermittelt und dadurch die Antigentranslokation in das Zytosol erleichtert.
• Es wird für den normalen lysosomalen Proteinabbau in proximalen Nierentubuli und für den Abbau von internalisiertem EGFR benötigt, wodurch es mit der Regulation der Zellproliferation verbunden wird.
• Das Protein lokalisiert überwiegend zu Lysosomen und wird ubiquär exprimiert, wobei die höchste Häufigkeit in Niere, Herz und Plazenta beobachtet wird.
• Legumain wird als Zymogen synthetisiert und erfährt proteolytische Aktivierung; es ist ein Glykoprotein, das Disulfidbindungen enthält und gehört zur C13-Familie der Cysteinpeptidasen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 210-302 des menschlichen Legumains, einer Region, die wahrscheinlich einen Teil der katalytischen Domäne enthält; dieses Design kann zur spezifischen Erkennung der reifen Protease beitragen.
• Für Western Blotting unter reduzierenden Bedingungen ist eine Bande um 49 kDa für die Vorläufer- oder reife Form zu erwarten; die Zugabe geeigneter Proteaseinhibitoren während der Probenvorbereitung wird empfohlen.
• Aufgrund der berichteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte kann der Antikörper bei vergleichenden Studien in diesen Spezies evaluiert werden, die Validierung sollte jedoch im entsprechenden Probenystem durchgeführt werden.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper sowohl für direkte als auch indirekte Formate geeignet sein; erwägen Sie die Paarung mit einem Nachweisantikörper, der ein anderes Epitop erkennt, für Sandwich-Assays.

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