Kaninchen-polyklonaler Anti-LDHA-Antikörper für IHC-P/IF/ICC/ELISA – P00338

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LDHA

• LDHA kodiert die L-Laktatdehydrogenase-A-Kette (auch bekannt als LDH-M, Protein des zellproliferationsinduzierenden Gens 19 oder Nierenkarzinomantigen NY-REN-59), die die reversible Umwandlung von Pyruvat und Laktat gekoppelt an die Umwandlung von NADH und NAD+ katalysiert.
• Als wichtiges glykolytisches Enzym ermöglicht LDHA die anaerobe Energiegewinnung, indem es während der Laktatfermentation NADH zu NAD+ regeneriert und dadurch die ATP-Produktion unter sauerstoffarmen Bedingungen unterstützt.
• LDHA wird überwiegend in der Skelettmuskulatur und der Leber exprimiert, also in Geweben mit hoher anaerober Stoffwechselaktivität.
• Das Protein ist im Zytoplasma lokalisiert, was mit seiner Funktion im Glykolysestoffwechsel übereinstimmt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung und Phosphorylierung. Außerdem unterliegt das Protein einer Ubiquitin-ähnlichen Konjugation, die seine Aktivität oder Stabilität regulieren kann.
• Genetische Variationen in LDHA stehen mit der Glykogenspeicherkrankheit Typ XI in Verbindung, einer Stoffwechselstörung, die durch Belastungsintoleranz und Myoglobinurie gekennzeichnet ist.
• Alternatives Spleißen des LDHA-Gens erzeugt mehrere Isoformen, die möglicherweise zur gewebespezifischen Regulation des Laktatstoffwechsels beitragen.
• LDHA kodiert die muskeltypische Untereinheit (LDH-M) des tetrameren Laktatdehydrogenase-Enzyms, die sich mit LDHB zu fünf verschiedenen Isoenzymen mit unterschiedlichen kinetischen Eigenschaften verbinden kann.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Die Immunogensequenz entspricht der N-terminalen Region (AS 1–100) des humanen LDHA. Es sollte in Betracht gezogen werden, die Spezifität des Antikörpers im jeweiligen experimentellen Kontext anhand positiver und negativer Kontrollen zu validieren.
• Für IHC-P sollten die Antigenrückgewinnung und die Verdünnung des Primärantikörpers optimiert werden. Gewebe mit hoher LDHA-Expression (z. B. Skelettmuskel und Leber) sollten eine deutliche zytoplasmatische Färbung zeigen.
• Bei IF/ICC ist auf eine geeignete Zellfixierung und Permeabilisierung zu achten, um das zytoplasmatische LDHA-Signal nachzuweisen. Eine Ko-Färbung mit Organellmarkern kann die Bestätigung der Lokalisation unterstützen.
• Für ELISA sollte der Antikörper sowohl in direkten als auch in Sandwich-Formaten mit geeigneten Standards getestet und seine Leistung über den erwarteten Konzentrationsbereich validiert werden.
• Da eine Kreuzreaktivität mit murinem LDHA berichtet wurde, kann der Antikörper für Studien in Mausmodellen geeignet sein. Die Kreuzreaktivität sollte jedoch im jeweiligen Assaysystem bestätigt werden.

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