Anti-LDB3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - O75112

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LDB3-Funktion und -Lokalisierung

• LDB3 (auch bekannt als ZASP oder Cypher) ist ein LIM-Domänen-bindendes Protein, das in quergestreifter Muskulatur als Adapter fungiert, um die Protein-Kinase-C-vermittelte Signalübertragung über seine LIM-Domänen mit dem Zytoskelett zu koppeln.
• Es lokalisiert an der sarkomerischen Z-Linie, wo es mit α-Aktinin und anderen Z-Scheiben-Proteinen interagiert und eine entscheidende Rolle bei der Myofibrillenassemblierung und -erhaltung spielt.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen mit differentieller Expression, was zur strukturellen und signalgebenden Vielseitigkeit des Proteins beiträgt.
• LDB3 wird hauptsächlich im Skelettmuskel exprimiert, mit geringerer Expression im Herzen und nachweisbaren Mengen im Gehirn und in der Plazenta.
• Das Protein enthält LIM-Domänen, eine PDZ-Domäne und ein ZASP-ähnliches Motiv, was Protein-Protein-Interaktionen und Zinkbindung ermöglicht.
• Mutationen in LDB3 sind mit verschiedenen Kardiomyopathien und Myopathien assoziiert, darunter dilatative Kardiomyopathie (CMD1C), hypertrophe Kardiomyopathie (CMH24) und myofibrilläre Myopathie (MFM4), was seine klinische Relevanz unterstreicht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Methylierung, die seine Funktion und Lokalisierung regulieren können.
• LDB3 findet sich auch in perinukleären Regionen und Pseudopodien, was auf potenzielle Rollen in der Zellsignalübertragung und -motilität jenseits des Sarkomers hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1-283), was darauf hindeutet, dass der Antikörper möglicherweise mehrere LDB3-Isoformen erkennt, die diese Sequenz teilen. Für isoform-spezifischen Nachweis mit bekannten Positivkontrollen validieren.
• Für Western Blotting ist die erwartete Bandengröße etwa 77 kDa (gemäß dem angegebenen Proteingewicht), die tatsächliche Migration kann jedoch aufgrund von alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen variieren. Einen Molekulargewichtsmarker verwenden und mit vorhergesagten Größen vergleichen.
• Bei Immunfluoreszenz (IF-P) und Immunhistochemie (IHC-P) lokalisiert LDB3 an den Z-Linien der quergestreiften Muskulatur, was ein charakteristisches streifiges Färbemuster ergibt. Gegenfärbung mit Phalloidin kann helfen, die sarkomerische Organisation zu visualisieren.
• Kreuzreaktivität in Maus- und Rattus-Geweben durch Vergleich mit humanen Proben validieren; leichte Variationen in der Signalintensität können auftreten.
• Für ELISA die Verwendung eines rekombinanten LDB3-Proteins als Standard in Betracht ziehen, um die Bindungssensitivität und die Robustheit des Assays zu bewerten.

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