Anti-LCK Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P06239

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LCK-Funktion und -Lokalisierung

• LCK ist eine 56 kDa lymphozytenspezifische Tyrosinkinase (p56lck) und ein Mitglied der Src-Familie. Sie enthält SH2- und SH3-Domänen und ist über N-terminale Myristoylierung und Palmitoylierung an die Plasmamembran verankert.
• LCK ist konstitutiv mit den cytoplasmatischen Schwänzen der CD4- und CD8-Corezeptoren assoziiert. Nach TCR-Engagement wird LCK in den TCR-CD3-Komplex rekrutiert, wo es Tyrosinreste innerhalb der ITAMs von CD3- und TCRζ-Ketten phosphoryliert und die Downstream-Signalübertragung einleitet. Verwandte Referenzen: PMID:2470098, PMID:40592325
• Diese Kinase phosphoryliert und aktiviert ZAP70, was zur Lymphozytenaktivierung und Lymphokinproduktion führt. LCK beteiligt sich auch an der IL-2-Rezeptor-Signalübertragung und phosphoryliert andere Substrate einschließlich RUNX3, PTK2B und RHOH. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• LCK wird spezifisch in lymphoiden Zellen exprimiert und ist während der gesamten Thymozytenentwicklung vorhanden, wobei sie sowohl die Checkpoints der prä-TCR- als auch der reifen αβ-TCR-Reifung reguliert.
• Subzellulär lokalisiert sich LCK auf der cytoplasmatischen Seite der Zellmembran und im Cytosol, wo sie bereitsteht, mit Oberflächenrezeptoren zu interagieren.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-terminale Lipidanker (Myristat und Palmitat), mehrere Phosphorylierungsereignisse (Autophosphorylierung bei Tyr394 und hemmende Phosphorylierung bei Tyr505 durch CSK) und Ubiquitinierung. Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen.
• LCK ist in Krankheiten involviert; chromosomale Umordnungen, die LCK betreffen, sind mit T-Zell-Lymphomen assoziiert, und Keimbahnmutationen können schwere kombinierte Immundefizienz verursachen. Virale Proteine wie HIV-1 Nef zielen auf LCK ab, um die T-Zell-Funktion zu modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 1-240) deckt die N-terminale einzigartige Domäne und die SH3-Domäne ab, die unter den Mitgliedern der Src-Familie weniger konserviert sind; dieses Design kann die Spezifität für LCK erhöhen.
• Für WB wird eine Bande bei ca. 56-58 kDa in Lysaten lymphoider Zellen (z. B. Jurkat, menschliche PBMCs, Maus-Milzzellen) erwartet. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und die Antikörperverdünnung für Ihr System.
• Für IHC-P ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval erforderlich; positive Kontrollgewebe umfassen menschlichen Thymus oder Lymphknoten. Validieren Sie die Färbung in relevanten experimentellen Proben.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-LCK; wenn Sie andere Spezies verwenden, überprüfen Sie die Reaktivität unabhängig.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz bewertet werden; er ist für ELISA-Anwendungen geeignet, wenn er mit geeigneten sekundären Antikörpern gepaart wird.

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