Anti-LCK Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA – P06239

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LCK

• LCK ist eine nicht-rezeptorbindende Tyrosin-Proteinkinase mit SH2- und SH3-Domänen, die vom LCK-Gen kodiert wird.
• Es spielt eine wesentliche Rolle bei der Selektion und Reifung sich entwickelnder T-Zellen im Thymus sowie bei der Funktion reifer T-Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• LCK ist ein zentraler Mediator der mit dem T-Zell-Antigenrezeptor (TZR) verbundenen Signalübertragung, ist dauerhaft mit den zytoplasmatischen Domänen von CD4 und CD8 assoziiert und phosphoryliert ITAMs auf TZR-Ketten, um die Signalgebung zu initiieren. Verwandte Referenzen: PMID:2470098, PMID:40592325
• Nach der TZR-Bindung phosphoryliert und aktiviert LCK ZAP70 und rekrutiert nachgeschaltete Signalmoleküle, die letztendlich zur Produktion von Lymphokinen führen. Verwandte Referenzen: PMID:2470098
• LCK beteiligt sich zudem an der mit dem IL2-Rezeptor verbundenen Signalgebung und interagiert mit FYB2, was zur proliferativen Antwort von T-Zellen beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:27335501
• Das Protein lokalisiert an der Zellmembran und im Zytosol (Uniorto subzelluläre Lokalisation: Zellmembran, Zytoplasma, Zytosol).
• LCK wird spezifisch in lymphoiden Zellen exprimiert und unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich alternatives Spleißen, Myristoylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Region (AS 1–210) des menschlichen LCK, einschließlich der SH3- und SH2-Domänen; dieses Design kann sowohl Volllängen- als auch bestimmte Spleißvarianten erkennen, validieren Sie daher die Spezifität in Ihrem Probenystem.
• Für das Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 58 kDa; optimieren Sie dementsprechend den Gelenprozentsatz und die Transferbedingungen.
• LCK wird spezifisch in lymphoiden Zellen exprimiert; verwenden Sie für den Nachweis von menschlichem LCK Jurkat-T-Zell-Lysat als Positivkontrolle.
• Für die Immunfluoreszenz (IF-P) optimieren Sie die Antikörperkonzentration und die Zellpermeabilisierungsprotokolle für membranassoziierte Zielproteine.
• Dieser Antikörper reagiert mit menschlichem und murinem LCK; bestätigen Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität in murinen lymphoiden Geweben.
• Da LCK an der TZR-Signalgebung beteiligt ist, kann die T-Zell-Aktivierung seinen Phosphorylierungsstatus verändern; kontrollieren Sie die Stimulationsbedingungen in Funktionsstudien sorgfältig.

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