Anti-LCAT-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P04180

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von LCAT

• LCAT (Phosphatidylcholin-Sterol-Acyltransferase), auch als Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase bezeichnet, ist ein zentrales Enzym im extrazellulären Lipoproteinstoffwechsel. Es wird überwiegend in der Leber synthetisiert und in das Plasma sezerniert. LCAT katalysiert auf der Oberfläche von Lipoproteinen hoher und niedriger Dichte (HDL und LDL) die Umwandlung von Cholesterin und Phosphatidylcholinen (Lecithinen) in Cholesterinester und Lysophosphatidylcholine und unterstützt dadurch den umgekehrten Cholesterintransport (PubMed:10329423, PubMed:19065001, PubMed:26195816). Zugehörige Referenzen: PMID:10329423 PMID:19065001 PMID:26195816

• Das Enzym weist eine Substratspezifität für die Plasma-Phosphatidylcholine 16:0-18:2 oder 18:O-18:2 auf und trägt zur Regulierung der Lipoproteinzusammensetzung bei (PubMed:8820107). Zugehörige Referenzen: PMID:8820107

• Im Gehirn wird LCAT von Astrozyten gebildet und verestert freies Cholesterin auf neu gebildeten APOE-haltigen Lipoproteinen. Dadurch beeinflusst es die APOE- und APOA1-Spiegel in der Zerebrospinalflüssigkeit. Zusammen mit APOE und ABCA1 ist LCAT für die Reifung glialer Lipoproteine und den Umbau von HDL-Partikeln in ihre kugelförmige Form unerlässlich (PubMed:10722751). Zugehörige Referenzen: PMID:10722751

• LCAT besitzt eine intrinsische Acetylhydrolase-Aktivität des plättchenaktivierenden Faktors (PAF-AH) und katalysiert sowohl die Hydrolyse von PAF zu Lyso-PAF als auch die Transacetylierung von PAF zu 1-Hexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholin. Dadurch verbindet es den Lipoproteinstoffwechsel mit der Regulation von Entzündungsmediatoren (PubMed:8016111). Zugehörige Referenzen: PMID:8016111

• Das Enzym verestert außerdem (24S)-Hydroxycholesterin (Cerebrosterol) zu 24(S)OH-C-Monoestern. Diese Reaktion könnte für die Aufrechterhaltung der Cholesterinhomöostase im Gehirn relevant sein (PubMed:24620755). Zugehörige Referenzen: PMID:24620755

• Als sezerniertes Protein wirkt LCAT hauptsächlich im extrazellulären Raum, einschließlich Plasma und Zerebrospinalflüssigkeit, wo es zirkulierende Lipoproteine modifiziert. Es ist ein Glykoprotein mit einem Signalpeptid und Disulfidbrücken, die für seine strukturelle Integrität entscheidend sind.

• Die Gewebeexpression ist in Leber, Gehirn und Hoden am höchsten. Eine signifikante Expression wird auch im Blutplasma und in der Zerebrospinalflüssigkeit nachgewiesen, was mit seiner Rolle im systemischen und neuronalen Lipidstoffwechsel übereinstimmt.

• Pathogene Varianten in LCAT werden mit Hornhautdystrophie und Störungen des HDL-Stoffwechsels in Verbindung gebracht, was seine klinische Relevanz bei lipidbezogenen Erkrankungen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst nahezu die gesamte Länge des humanen LCAT (Aminosäuren 25–440), was darauf hindeutet, dass der Antikörper mehrere Epitope erkennen kann und sich zum Nachweis sowohl nativer als auch denaturierter Proteine eignet.
• Für Western Blotting sollten standardmäßige SDS-PAGE- und Transferbedingungen verwendet werden; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 50 kDa. Aufgrund der polyklonalen Natur können mehrere Banden auftreten. Geeignete negative und positive Kontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem LCAT wurde berichtet, wodurch dieser Antikörper für Untersuchungen in Mausmodellen geeignet sein kann. Die artspezifische Reaktivität sollte jedoch im jeweiligen experimentellen System validiert werden.
• Bei ELISA-Anwendungen sollten die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung optimiert werden, um die gewünschte Sensitivität zu erreichen, da polyklonale Antikörper unterschiedliche Bindungseigenschaften aufweisen können.

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