Anti-LC3B monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9GZQ8

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LC3B-Funktion und Lokalisierung

• LC3B, auch bekannt als Mikrotubuli-assoziiertes Protein 1 leichte Kette 3 Beta (MAP1LC3B) oder Autophagie-verwandtes Protein ATG8F, ist eine Kernkomponente der Autophagie-Maschinerie.
• Es fungiert als Ubiquitin-ähnlicher Modifikator in den frühen Stadien der Phagophor-Elongation während der Autophagosomen-Biogenese; die verwandten GABARAP/GATE-16-Proteine sind für spätere Reifungsschritte erforderlich.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:20418806
  PMID:23209295
  PMID:28017329
• Bei der Mitophagie bindet LC3B C-18-Ceramide und verankert Autophagolysosomen an äußeren Mitochondrienmembranen, wodurch der selektive Abbau geschädigter Mitochondrien gefördert und die mitochondriale Qualität reguliert wird.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22922758
  PMID:23209295
  PMID:28017329
• Es trägt zur primären Ziliogenese bei, indem es den autophagischen Abbau von OFD1 von zentriolaren Satelliten vermittelt.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:24089205
• LC3B interagiert mit dem Reticulophagie-Rezeptor TEX264, um während Nährstoffstress Subdomänen des endoplasmatischen Retikulums in Autophagosomen umzuwandeln und so den ER-Umsatz zu erleichtern.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:31006537
  PMID:31006538
• Bei Nährstoffmangel rekrutiert LC3B direkt den Aktin-Nukleations-fördernden Faktor JMY an die Phagophormembran, stimuliert die Aktin-Polymerisation und treibt die Autophagosomen-Biogenese an.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:30420355
• Das Protein lokalisiert hauptsächlich an Autophagosomenmembranen, zytoplasmatischen Vesikeln, dem Endomembransystem, der äußeren Mitochondrienmembran und dem Zytoskelett.
• Seine Expression ist am höchsten in Herz, Gehirn, Skelettmuskel und Hoden, mit minimalen Werten in der Leber.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen die Aminosäuren 1–125 von humanem LC3B umfasst, kann der Antikörper sowohl die nicht-lipidierten LC3B-I- als auch die lipidierten LC3B-II-Formen erkennen; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und validieren Sie in Ihrem experimentellen System, um den Autophagie-Fluss zu unterscheiden.
• Für Western Blot wird ein Band bei ~15 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung eines reduzierenden SDS-PAGE-Gels und bestätigen Sie die Bandspezifität in relevanten Human-, Maus- oder Rattenproben.
• Führen Sie bei der Durchführung von ELISA eine Optimierung der Antikörperverdünnung und Beschichtungsbedingungen für das spezifische Assay-Format durch; validieren Sie mit rekombinantem oder zell-abgeleitetem LC3B-Antigen.
• Kreuzreaktivität mit endogenem LC3B in Maus und Ratte ist berichtet; testen Sie in positiven und negativen Kontrolllysaten, um die Signallinearität in Ihrem Modell sicherzustellen.

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