Anti-LC3A/LC3B Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - Q9GZQ8/Q9H492

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: LC3A/LC3B-Funktion und -Lokalisierung

• Mikrotubuli-assoziiertes Protein 1 leichte Kette 3 beta (LC3B, auch bekannt als ATG8F) ist ein Ubiquitin-ähnlicher Modifikator, der eine zentrale Rolle in der Autophagie spielt, insbesondere bei der Bildung von autophagosomalen Vakuolen (Autophagosomen). Verwandte Referenzen: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B ist entscheidend für die Mitophagie, einen selektiven Autophagieprozess, der beschädigte Mitochondrien entfernt; nach mitochondrialer Fragmentierung und zellulärem Stress bindet LC3B an C-18-Ceramide, um Autophagolysosomen an die äußeren Mitochondrienmembranen zu verankern. Verwandte Referenzen: PMID:23209295, PMID:28017329, PMID:22922758
• LC3B fördert die primäre Ziliogenese, indem es OFD1 über den autophagen Weg aus den zentriolären Satelliten entfernt. Verwandte Referenzen: PMID:24089205
• Durch die Interaktion mit dem Retikulophagie-Rezeptor TEX264 nimmt LC3B an der Umwandlung des endoplasmatischen Retikulums in Autophagosomen während Nährstoffstress teil, die anschließend mit Lysosomen für den ER-Umsatz verschmelzen. Verwandte Referenzen: PMID:31006537, PMID:31006538
• Bei Nährstoffstress rekrutiert LC3B direkt den Aktin-Nukleationsfaktor JMY an die Oberflächen der Phagophormembranen, fördert die Aktin-Nukleation und die Biogenese von Autophagosomen. Verwandte Referenzen: PMID:30420355
• Subzellulär kommt LC3B auf Autophagosomenmembranen, zytoplasmatischen Vesikeln, dem Endomembransystem, mitochondrialen Membranen und dem Zytoskelett vor.
• LC3B wird am stärksten in Herz, Gehirn, Skelettmuskulatur und Hoden exprimiert, mit geringer Expression in der Leber.
• LC3B wird unter dem Autophagie- und Ubiquitin-ähnlichen Konjugationsweg klassifiziert; es kommt als Lipoprotein und Phosphoprotein vor, was auf seine regulatorischen Modifikationen hinweist. Dieser Antikörper erkennt auch LC3A (MAP1LC3A), ein eng verwandtes Paralogon mit konservierten Funktionen in der Autophagie.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus dem N-Terminus (aa 1-60) von humanem LC3A, einer Region, die mit LC3B hochkonserviert ist. Erwarten Sie aufgrund der Sequenzhomologie eine Kreuzreaktivität mit beiden LC3A- und LC3B-Formen.
• Im Western Blot können sowohl die unlipidierte (LC3-I) als auch die lipidierte (LC3-II) Form nachgewiesen werden; LC3-II wandert im SDS-PAGE etwas langsamer (~14-16 kDa). Führen Sie geeignete Kontrollen durch (z. B. Induktion der Autophagie durch Hungerstreckung oder Hemmstoffe), um die Formen zu unterscheiden.
• Für Immunfluoreszenz-Anwendungen optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da LC3 oft autophage Strukturen (Puncta) markiert. Eine Co-Färbung mit lysosomalen Markern kann helfen, den autophagen Fluss zu bestätigen.
• In der Immunhistochemie ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval aufgrund der Epitop-Lokalisierung erforderlich. Validieren Sie die Antikörperspezifität mittels si/shRNA-Knockdown oder Blockierpeptid, wo möglich.

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