Anti-Lamin A/C monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Lamin A/C

• Lamin A und C sind Hauptbestandteile der Kernlamina, einem fadenförmigen Netzwerk unter der inneren Kernmembran, und werden durch alternatives Spleißen vom LMNA-Gen kodiert.
• Sie bieten strukturelle Unterstützung für die Kernhülle, verbinden Chromatin und Kernhülle und regulieren den Kernaufbau, die Chromatinorganisation und die Telomer-Dynamik. Zugehörige Referenzen: PMID:10080180, PMID:10580070, PMID:10587585
• Intermediate Filamente spielen eine Rolle bei der DNA-Reparatur: Lamin A/C wird durch XRCC4 und IFFO1 an doppelsträngige DNA-Brüche rekrutiert und immobilisiert gebrochene DNA-Enden, um Chromosomentranslokationen zu verhindern. Zugehörige Referenzen: PMID:31548606
• Lamin A/C reguliert die Matrixsteifigkeit durch die Verleihung nuklearer mechanischer Eigenschaften und beeinflusst Zellmigration und Differenzierung. Zugehörige Referenzen: PMID:23990565, PMID:25127216
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Kernlamina, Kernhülle, Nukleoplasma, Kernmatrix und Kernspeckel.
• Posttranslationale Modifikationen wie Prenylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Acetylierung und Isopeptidbindung regulieren den Laminaufbau und die Laminfunktion.
• Gewebespezifisch reichert sich Prelamin-A/C in gealterten vaskulären glatten Muskelzellen und atherosklerotischen Läsionen an und trägt zur zellulären Seneszenz bei. Zugehörige Referenzen: PMID:20458013
• Mutationen in LMNA verursachen Laminopathien, darunter Emery-Dreifuss-Muskeldystrophie, dilatative Kardiomyopathie, Lipodystrophie und Progerie-Syndrome.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 403–572, was der C-terminalen Schwanzdomäne entspricht, die Lamin A und C gemeinsam ist. Diese Domäne ist unter Intermediate Filament-Proteinen wenig konserviert, was auf eine hohe Spezifität hindeutet.
• Für Western Blot beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht ~74 kDa für Lamin A und ~65 kDa für Lamin C; beide Banden können nachgewiesen werden. Validieren Sie mit Kernextrakten aus humanen, murinen oder Ratten-Zelllinien.
• Für IHC-P und IF/ICC wird eine Färbung von Kernhülle und Nukleoplasma erwartet. Für formalinfixierte Gewebe kann eine Optimierung der Antigenretrieval und Permeabilisierung erforderlich sein.
• Für IP und ELISA kann der Antikörper zur Anreicherung von Lamin A/C-Komplexen verwendet werden; dennoch sollten Blockier- und Waschbedingungen empirisch ermittelt werden.
• Aufgrund der KO-Validierung ist dieser Antikörper geeignet, um die Depletion von Lamin A/C zu bestätigen und Verlust-der-Funktions-Phänotypen in Assays zur Kernorganisation und DNA-Reparatur zu untersuchen.

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