Anti-Lactyl-Histon H4 (K5) Kaninchen polyklonaler Antikörper (P62805) für WB, DB, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H4

Histon H4 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet, um den Zugang für Transkription, DNA-Reparatur, Replikation und chromosomale Stabilität zu regulieren. Die dynamische Modulation der Chromatinstruktur wird durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen (PTMs) gesteuert, die kollektiv als „Histon-Code“ bezeichnet werden. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Die Lactylierung von Histon H4 an Lysin 5 (entspricht K6 in der UniProt-Nummerierung) wurde als neuartiges epigenetisches Merkmal identifiziert, das den Zellstoffwechsel mit der Genregulation verknüpft. Diese Modifikation wurde in Makrophagen und Tumorzellen charakterisiert, wo sie durch Laktatanreicherung induziert wird und zur Aktivierung von reparativen Genexpressionsprogrammen beiträgt PMID:31645732. Zusätzliche Lactylierungsstellen wurden auf K9, K13, K17, K32, K78 und K92 kartiert, was die weit verbreitete Rolle dieser Acylierung im Chromatin-Signaling unterstreicht PMID:31645732, PMID:37720100.

Histon H4 lokalisiert hauptsächlich im Zellkern und wird während des gesamten Zellzyklus in Chromosomen integriert. Acetyliertes H4 ist in den Kernen reifender Spermatiden angereichert UniProt P62805.

Über die Lactylierung hinaus unterliegt Histon H4 einer umfangreichen und kombinatorischen Modifikation, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Crotonylierung, Succinylierung und Butyrylierung an mehreren Resten, die jeweils zu unterschiedlichen Chromatinzuständen und funktionellen Ergebnissen beitragen. Wichtige Modifikationsstellen und ihre modifizierenden Enzyme wurden umfangreich katalogisiert. Verwandte Referenzen: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:21925322, PMID:22389435, PMID:27105113.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches lactyliertes Peptid, das Lysin 5 von menschlichem Histon H4 umfasst. Für eine optimale Spezifität sollten Sie in Ihrem Assay ein nicht-lactyliertes Peptid oder Vor-Adsorptionskontrollen in Betracht ziehen.
• Dieser Antikörper ist für Western Blot (WB), Dot Blot (DB) und ELISA gemeldet. Für WB wird ein typisches Band bei ~11 kDa erwartet. Der Nachweis von endogenem lactyliertem Histon H4 kann aufgrund einer geringen Stöchiometrie eine Anreicherung oder Optimierung der Lysebedingungen erfordern.
• Die vorhergesagte breite Kreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte und andere) deutet auf konservierte Epitopsequenzen über verschiedene Spezies hin. Dennoch wird eine speziesabhängige Validierung empfohlen.
• Wenn Sie diesen Antikörper in ELISA oder Dot Blot verwenden, bestätigen Sie die Beschichtungseffizienz mit positiven Kontrollantigenen (lactyliert) und erwägen Sie eine Blockierung mit lactyliertem BSA, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Für chromatinbezogene Anwendungen sind Histon-Extraktionsprotokolle (Säureextraktion oder Salzextraktion) ratsam, um markierte Histone anzureichern.
• Validieren Sie stets die Leistung des Antikörpers im relevanten Probenystem, da posttranslationale Modifikationen kontextabhängig sind und mit dem Zelltyp und dem Stoffwechselzustand variieren können.

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