Anti-Ku80-Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P13010

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Ku80-Funktion und Lokalisierung

• Das Ku80-Protein, auch bekannt als XRCC5, KU86, KUB2 oder NFIV, ist die 86 kDa-Untereinheit des Ku-Autoantigens, eines heterodimeren DNA-Bindungs-Komplexes, der für die Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSBs) über den klassischen nicht-homologen Endverknüpfungsweg (NHEJ) essentiell ist. Zusammen mit XRCC6 (Ku70) bildet es das Ku70:Ku80-Heterodimer, das direkt an DSB-Enden bindet und als Gerüst für den Zusammenbau der NHEJ-Reparaturmaschinerie dient, einschließlich PRKDC (DNA-PKcs), um gebrochene DNA-Enden auszurichten und zu verknüpfen. Verwandte Referenzen: PMID:11493912, PMID:33854234, PMID:34352203
• Ku80 ist unverzichtbar für die V(D)J-Rekombination, einen spezialisierten, NHEJ-gesteuerten Prozess, der während der Lymphozytenentwicklung das vielfältige Repertoire an T-Zell-Rezeptoren und Immunglobulinen erzeugt. Verwandte Referenzen: PMID:9742108
• Zusätzlich zu seiner strukturellen Rolle besitzt Ku80 eine 5'-Desoxyribose-5-Phosphat-Lyase-Aktivität, die apurinische/apyrimidinische Stellen in der Nähe von DSB-Termini bereinigt, um sie für die Ligation vorzubereiten. Eine 3'-5'-DNA-Helikase-Aktivität wurde ebenfalls beschrieben, obwohl ihre in-vivo-Bedeutung ungewiss bleibt. Verwandte Referenzen: PMID:20383123, PMID:7957065
• Ku80 ist an der Telomererhaltung beteiligt und trägt zum Schutz und zur Regulation der Chromosomenenden bei. Verwandte Referenzen: PMID:29490055
• Über die DNA-Reparatur hinaus fungiert Ku80 als transkriptioneller Kofaktor, der die Genexpression durch Interaktion mit verschiedenen Transkriptionsfaktoren reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku80 ist an der angeborenen Immunantwort auf DNA-Viren beteiligt, indem es sich in den HDP-RNP-Komplex einbaut, der als Plattform für die IRF3-Phosphorylierung dient und den cGAS-STING-Signalweg aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:28712728
• Ku80 kann zelluläre RNAs binden und PRKDC rekrutieren, wodurch es eine Rolle in der Ribosomenbiogenese spielt, insbesondere durch Interaktion mit U3-kleiner nukleolärer RNA. Verwandte Referenzen: PMID:32103174
• Ku80 ist hauptsächlich im Zellkern und Nukleolus lokalisiert, assoziiert mit Chromatin und unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung, ADP-Ribosylierung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Immundesign: Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erzeugt, das die Aminosäuren 633–732 von humanem Ku80 umfasst. Bei der Planung von Validierungsexperimenten sollte berücksichtigt werden, dass diese Region posttranslationalen Modifikationen oder alternativen Spleißereignissen unterliegen könnte, die die Antikörperbindung beeinflussen könnten.
• Western Blot (WB): Erwartet wird ein spezifisches Band bei etwa 83 kDa in humanen Zelllysaten. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein (z.B. Ku80-Knockout- oder siRNA-behandelte Proben), um die Spezifität zu bestätigen.
• Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC): Ku80 zeigt eine nukleäre und nukleoläre Lokalisierung. Optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Ihren Gewebe- oder Zelltyp und validieren Sie die Färbung mit einem bekannten nukleären Marker.
• Immunpräzipitation (IP): Dieser Antikörper kann verwendet werden, um den Ku70/Ku80-Komplex herauszuziehen. Die Co-Immunpräzipitation von Ku70 (XRCC6) dient als Funktionskontrolle.
• ELISA: Geeignet für direkte oder Sandwich-ELISA-Formate. Validieren Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies, da der Antikörper für humane Reaktivität spezifiziert ist.

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