Anti-Ku70 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA – P12956

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Ku70

• Ku70 (XRCC6) ist ein zentrales DNA-bindendes Protein, das die Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSB) über den klassischen nicht-homologen Endverbindungsweg (NHEJ) vermittelt. Es bildet mit Ku80 (XRCC5) ein Heterodimer, das den Ku-Komplex bildet. Dieser erkennt und bindet spezifisch gebrochene DNA-Enden und dient als Gerüst für die Rekrutierung essenzieller Reparaturfaktoren. (PubMed:11493912, PubMed:20493174, PubMed:33854234) Zugehörige Referenzen: PMID:11493912, PMID:20493174, PMID:33854234
• Der Ku-abhängige NHEJ-Weg ist entscheidend für die V(D)J-Rekombination, den Prozess, der die Diversität von Antikörpern und T-Zell-Rezeptoren erzeugt – dies unterstreicht seine essentielle Rolle für die adaptive Immunabwehr. (PubMed:9742108) Zugehörige Referenzen: PMID:9742108
• Ku70 verfügt über eine 5'-Desoxyribose-5-Phosphat-Lyase-Aktivität (5'-dRP), die abasische Stellen in der Nähe von DSBs aufreinigt und die DNA-Enden für die Ligation vorbereitet. In-vitro-Studien deuten zudem auf eine 3'-5'-DNA-Helikase-Aktivität hin, deren physiologische Relevanz bislang unklar ist. (PubMed:20383123, PubMed:7957065) Zugehörige Referenzen: PMID:20383123, PMID:7957065
• Über die Reparatur hinaus trägt Ku70 zur Telomererhaltung bei und wirkt als Transkriptionscofaktor für verschiedene Transkriptionsfaktoren, wodurch die DNA-Reparatur mit weiteren zellulären Prozessen verknüpft wird. (PubMed:29490055, PubMed:12145306, PubMed:8621488) Zugehörige Referenzen: PMID:29490055, PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku70 spielt eine Rolle in der angeborenen antiviralen Immunität durch die Assemblierung des HDP-RNP-Komplexes, der die IRF3-Phosphorylierung und die Aktivierung des cGAS-STING-Weges fördert. (PubMed:28712728) Zugehörige Referenzen: PMID:28712728
• Es kann auch an zelluläre RNAs binden und PRKDC rekrutieren, um an der Ribosomen-RNA-Biogenese teilzunehmen – dies zeigt die funktionelle Vielseitigkeit des Proteins. (PubMed:32103174) Zugehörige Referenzen: PMID:32103174
• Ku70 reguliert Apoptose negativ, indem es mit BAX interagiert und es von den Mitochondrien fernhält; zudem kann es BAX deubiquitinieren. (PubMed:15023334, PubMed:18362350, PubMed:35545041) Zugehörige Referenzen: PMID:15023334, PMID:18362350, PMID:35545041
• Subzellulär ist Ku70 hauptsächlich im Zellkern und assoziiert mit Chromosomen lokalisiert, kann aber unter bestimmten Bedingungen auch im Zytoplasma nachgewiesen werden – was konsistent mit seinen vielfältigen Funktionen ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid entsprechend der Aminosäuren 501-600 von humanem Ku70. Es wird erwartet, dass dieser interne Bereich Antikörper erzeugt, die das native, vollständige Protein erkennen. Es empfiehlt sich, die Antikörperspezifität mittels Knockdown- oder Knockout-Zelllysaten zu validieren.
• Aufgrund der angegebenen Anwendungen (WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA) empfehlen wir, die Verdünnungen für jeden Assay experimentell zu optimieren. Für den Western Blot ist eine Bande um 70 kDa zu erwarten; für dieses Target sind reduzierende Bedingungen üblich.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Ku70 ist beschrieben; Nutzer sollten die Leistungsfähigkeit in ihren spezifischen Probensystemen bestätigen. Für IHC und IF sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle getestet werden.
• Da polyclonale Antikörper Charge-to-Charge-Variationen aufweisen können, müssen in allen Experimenten geeignete Positiv- und Negativkontrollen mitgeführt werden.

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