Anti-KSR1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q8IVT5

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KSR1-Funktion und Lokalisierung

• KSR1 (Kinase Suppressor of Ras 1) ist ein Gerüstprotein und mutmaßliche Serin/Threonin-Proteinkinase, das eine zentrale Rolle in der MAPK-Signalkaskade spielt.
• Es bildet einen Teil eines Multiprotein-Signalkomplexes, der die Phosphorylierung von Raf-Familienmitgliedern und die Aktivierung nachgeschalteter MAP-Kinasen fördert.
• Wirkt als MAP2K1/MEK1- und MAP2K2/MEK2-abhängiger allosterischer Aktivator von BRAF; nach Bindung an MEK dimerisiert es mit BRAF und stimuliert die BRAF-vermittelte MEK-Phosphorylierung (PubMed:29433126). Verwandte Referenzen: PMID:29433126
• Fördert die Aktivierung von MAPK1/ERK2 und MAPK3/ERK1 als Reaktion auf EGF- und cAMP-Stimulation.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellmembran, Rüschenmembran und endoplasmatische Retikulum-Membran, was mit seinen dynamischen Signaltransduktionsrollen übereinstimmt.
• Enthält eine Zinkfinger-Domäne und zeigt ATP-Bindungsaktivität; seine intrinsische Kinaseaktivität ist jedoch umstritten und kann kontextabhängig sein.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein wird durch Phosphorylierung reguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 320–420) liegt außerhalb der Kinasedomäne; Sequenzhomologie mit Maus- und Ratten-KSR1 unterstützt die Kreuzreaktivität, aber die genaue Epitopregion sollte durch Alignment überprüft werden.
• Für Western Blot ist eine Bande nahe 102 kDa zu erwarten; optimieren Sie die Lyse- und Ladebedingungen mit positiven Kontrollzelllinien (z.B. HeLa, NIH/3T3).
• Bei Immunfluoreszenz/ICC testen Sie sowohl Methanol- als auch Formaldehyd-Fixierung, da KSR1 in Membranrüschen und dem endoplasmatischen Retikulum lokalisiert; Permeabilisierung mit Triton X-100 oder Digitonin kann erforderlich sein.
• Für ELISA erwägen Sie die Paarung mit einem Detektionsantikörper gegen ein nicht überlappendes Epitop nach Validierung der Bindungsaffinität und Spezifität.

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