Anti-KRAS+HRAS+NRAS Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P01111/P01112/P01116

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KRAS+HRAS+NRAS Funktion und Lokalisierung

• NRAS fungiert als Signaltransduktor im RAS-MAPK-Signalweg, reguliert Zellproliferation und -überleben durch zyklische Bindung von GDP/GTP und intrinsischer GTPase-Aktivität (PubMed:30712867).
  Verwandte Referenzen: PMID:30712867
• KRAS, HRAS und NRAS weisen eine hohe Sequenzähnlichkeit auf, insbesondere in der N-terminalen Domäne (aa 1-100), die die Immunogenregion ist, wodurch dieser Antikörper alle drei Isoformen detektieren kann.
• Onkogene Mutationen in NRAS (häufig an Codons 12, 13 und 61) sind häufig in humanen Krebsarten, und der Antikörper erkennt sowohl Wildtyp- als auch Mutantenformen, was ihn für die onkologische Forschung wertvoll macht.
• NRAS lokalisiert hauptsächlich an der Plasmamembran und dem Golgi-Apparat, wo es Signalereignisse an diesen Orten vermittelt.
• Posttranslationale Modifikationen wie Prenylierung und Palmitoylierung sind entscheidend für die Membranzielung und biologische Aktivität von NRAS.
• Die E3-Ubiquitin-Ligase LZTR1 vermittelt die Ubiquitinierung von NRAS, führt zum proteasomalen Abbau und dient als Regulationsmechanismus (PubMed:40934300).
  Verwandte Referenzen: PMID:40934300

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 von humanem Ras (P01111) entspricht, einer konservierten Region über KRAS, HRAS und NRAS hinweg. Ziehen Sie in Betracht, die Spezifität mit isoform-spezifischen Knockdown- oder Knockout-Zelllinien zu validieren, falls erforderlich.
• Für Western Blot (WB) ist unter reduzierenden Bedingungen ein Band bei etwa 21 kDa zu erwarten. Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und ziehen Sie die Verwendung von RIPA-Lysepuffer für eine effektive Extraktion membrangebundenen Ras in Betracht.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) werden Ras-Proteine typischerweise an der Plasmamembran und dem Golgi beobachtet; Permeabilisierung ist erforderlich. Kernfärbung wird nicht erwartet.
• Für die Immunpräzipitation (IP) verwenden Sie optimierte Lysepuffer, die nichtionische Detergenzien und Protease-/Phosphatase-Inhibitoren enthalten, um Protein-Protein-Wechselwirkungen zu erhalten. Vorreinigung und Antikörpertitration können die Spezifität verbessern.
• Die ELISA-Leistung sollte mit rekombinantem Ras-Protein oder Zelllysaten evaluiert werden; die Nachweisgrenze hängt vom verwendeten Assay-Format und Nachweissystem ab.

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