Anti-KLRK1 Kaninchen polyklonaler Antikörper für IF/ICC und ELISA - P26718

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von KLRK1/NKG2D

• KLRK1 (auch bekannt als NKG2D, CD314) codiert das NKG2-D Typ II integrale Membranprotein, ein Killerzell-Lektin-ähnliches Rezeptor Untergruppe K Mitglied 1. Es fungiert als aktivierender und kostimulatorischer Rezeptor, der zentral für die angeborene und adaptive Immunüberwachung ist.
• Nach Bindung an stressinduzierbare MHC-Klasse-I-verwandte Liganden (z. B. MICA/B, ULBP1-6) auf Tumor- oder virusinfizierten Zellen übermittelt NKG2D stimulatorische Signale, die einen Kalziumeinstrom auslösen und in der Expression von TNF-alpha und Perforin-vermittelter Zytotoxizität gipfeln.
• In natürlichen Killer (NK)-Zellen liefert NKG2D sowohl primäre Aktivierung als auch kostimulatorische Signale, während er in CD8+ T-Zellen als kostimulatorischer Rezeptor wirkt, der TCR-vermittelte adaptive Antworten verstärkt.
• Der Rezeptor wird auf praktisch allen CD56+CD3- NK-Zellen aus dem peripheren Blut exprimiert, sowie auf CD8+ Alpha-Beta- und Gamma-Delta-T-Zellen und Interferon-produzierenden Killer-Dendritischen Zellen (IKDCs).
• Subzellulär lokalisiert sich NKG2D als Transmembranprotein mit Signal-Anker-Topologie an der Zellmembran. Es unterliegt Glykosylierung und enthält eine Disulfidbindung innerhalb seiner extrazellulären Ligandenbindungsdomäne.
• Strukturelle Studien (3D-Struktur) haben die Bindungsoberfläche an Liganden aufgeklärt, das Protein ist Mitglied des Referenzproteoms, alternatives Spleißen erzeugt zusätzliche Isoformen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen war ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 50–150 von humanem KLRK1 (NP_031386.2) umfasst. Für eine korrekte Erkennung stellen Sie sicher, dass der Antikörper auf Proben angewendet wird, bei denen die Zielsequenz erhalten ist und das Epitop zugänglich ist (z. B. nicht denaturierende Bedingungen für IF/ICC).
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen zellulären Kontext mit Positivkontrollen wie IL-2-aktivierten NK-Zellen oder CD8+-T-Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie KLRK1 exprimieren. Für ELISA erwägen Sie die Paarung mit einem Fangantikörper, wenn Sie einen Sandwich-Immunoassay entwickeln.
• Obwohl hier nicht getestet, ist KLRK1 ein Transmembranprotein mit einer extrazellulären Ligandenbindungsdomäne; erwägen Sie bei Durchflusszytometrie-Experimenten Zelloberflächenfärbeprotokolle, die eine Permeabilisierung vermeiden, um intakte Membranen nachzuweisen.

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