Anti-KLRK1-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P26718

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: KLRK1 (NKG2-D) Funktion und Lokalisierung

• NKG2-D, kodiert durch das KLRK1-Gen (auch bezeichnet als D12S2489E, NKG2D), ist auch bekannt als Killer-Cell-Lectin-like-Receptor-Subfamilie K Mitglied 1, CD314 oder NK-Zellrezeptor D. Es ist ein Typ-II-Integralmembranprotein.
• Fungiert als aktivierender und kostimulatorischer Rezeptor, der für die Immunüberwachung von zentraler Bedeutung ist. Es erkennt stressinduzierbare MHC-Klasse-I-ähnliche Liganden (z. B. MICA, MICB, ULBP1-6) auf Tumor- und virusinfizierten Zellen und löst die NK-Zell-Zytotoxizität und die CD8+-T-Zell-Kostimulation aus.
• Die Signalübertragung über NKG2-D beinhaltet einen Calcium-Einstrom und führt zur Perforin-vermittelten Elimination von Zielzellen sowie zur Expression von TNF-alpha.
• Lokalisiert auf der Zellmembran wird es hauptsächlich auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen), CD8+-Alpha-Beta-T-Zellen, Gamma-Delta-T-Zellen und interferonproduzierenden Killer-Dendritischen Zellen (IKDCs) exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken. Es enthält eine Signalanker-Sequenz und eine einzelne Transmembranhelix.
• Neben der antitumoralen Immunität nimmt NKG2-D an der Abstoßung von Knochenmarkstransplantaten teil und kann die Differenzierung und das Überleben von NK-Zellen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 77–216) entspricht der extrazellulären Domäne von humanem KLRK1, was die Erkennung mehrerer Epitope nahelegt, was die Empfindlichkeit in WB und ELISA erhöhen kann.
• Für den WB verwenden Sie reduzierende Bedingungen und Ganzzell-Lysate aus humanen oder murinen NK-Zelllinien (z. B. NK-92). Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~25 kDa, aber Glykosylierung kann eine Verschiebung zu höheren Massen verursachen; validieren Sie mit einer Positivkontrolle.
• In ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; jedoch müssen die optimalen Arbeitskonzentrationen experimentell ermittelt werden. Validieren Sie die Kreuzreaktivität in murinen Proben, da der Hersteller eine Reaktivität mit sowohl humanen als auch murinen Proteinen angibt.
• Ein geeigneter sekundärer Antikörper (Anti-Kaninchen) und ein Blocking-Puffer sind erforderlich. Vermeiden Sie Gefrier-Auftau-Zyklen, um die Stabilität zu erhalten.

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