Anti-Klotho Polyklonale Antikörper für WB und ELISA - Q9UEF7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Klotho

• Klotho (KL) ist ein einzügiges Transmembranprotein vom Typ I, das beim Menschen durch das KL-Gen codiert wird, und existiert auch als sekretiertes Peptid, das durch proteolytische Spaltung entsteht.
• Es weist β-Glucuronidase-Aktivität auf und ist in der Lage, steroidale β-D-Glucuronide wie Estradiol-3-β-D-Glucuronid, Estron-3-β-D-Glucuronid und Estriol-3-β-D-Glucuronid zu hydrolysieren.
• Klotho wirkt als obligater Korezeptor für FGF23, der essenziell für die Bindung von Fibroblastenwachstumsfaktor 23 (FGF23) an FGFR1 ist und die FGF23-regulierte renale Vitamin-D-Metabolismus und Phosphatrückresorption vermittelt.
• Die abgespaltene lösliche Klotho-Ektodomäne fungiert als zirkulierendes Anti-Aging-Hormon, das die Lebensdauer möglicherweise durch Hemmung der Insulin/IGF1-Signalgebung verlängert.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die apikale Zellmembran (membrangebundene Isoform) und Sekretion (lösliche Isoform), was autokrine, parakrine und endokrine Funktionen ermöglicht.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in Niere, Plazenta, Dünndarm und Prostata; lösliches Klotho ist in Serum und Liquor vorhanden und wird bei bestimmten Krebserkrankungen und chronischer Nierenerkrankung herunterreguliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, das Protein wird zur Familie der Glycosidasen, Hormone und Hydrolasen gezählt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen deckt den N-terminalen Bereich (AA 1–200) des menschlichen Klotho ab, der sowohl bei der Membran- als auch bei der sekretierten Isoform vorhanden ist; berücksichtigen Sie dies bei der Gestaltung von Detektionsassays.
• Für Western Blot (WB) wandert Klotho bei etwa 116 kDa; fügen Sie Positivkontrollen aus Niere-, Plazenta- oder Prostata-Lysaten (Mensch, Maus oder Ratte) hinzu, da diese Gewebe das Protein exprimieren.
• Bei der Durchführung von ELISA validieren Sie die Antikörperspezifität mit rekombinantem Klotho-Protein oder biologischen Flüssigkeiten, in denen lösliches Klotho reichlich vorhanden ist, wie Serum oder Liquor.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Klotho ist vorhergesagt; dennoch werden Sequenzalignment und Vorversuche empfohlen, um eine ähnliche Reaktivität bei diesen Spezies zu bestätigen.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und Detektionsbedingungen für jede Anwendung; typische Startverdünnungen sollten empirisch bestimmt werden.

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