Anti-KLF4 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O43474

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KLF4-Funktion und Lokalisierung

• KLF4 (Krueppel-ähnlicher Faktor 4), auch bekannt als Epitheliales Zinkfingerprotein EZF oder Darm-angereicherter Krueppel-ähnlicher Faktor, ist ein Transkriptionsfaktor, der sowohl als Aktivator als auch als Repressor fungieren kann. Er bindet an die 5'-CACCC-3'-Kern-DNA-Sequenz.
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der Regulation der Expression wichtiger Transkriptionsfaktoren während der Embryonalentwicklung und ist essentiell für die Aufrechterhaltung der Pluripotenz embryonaler Stammzellen, während es die Differenzierung verhindert.
• Erforderlich für die Etablierung der Barrierefunktion der Haut und für die postnatale Reifung und Aufrechterhaltung der Augenoberfläche; beteiligt an der Differenzierung von Epithelzellen und kann auch bei der Skelett- und Nierenentwicklung eine Rolle spielen.
• Trägt zur Herunterregulierung der p53/TP53-Transkription bei, was es mit Zellzykluskontrolle und Apoptosewegen verbindet.
• Subzellulär sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma lokalisiert, was mit seinen transkriptionellen Regulierungsfunktionen und möglichen extra-nukleären Rollen übereinstimmt.
• Enthält Zinkfinger-DNA-Bindungsdomänen, die eine direkte Interaktion mit DNA ermöglichen, und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung, Ubiquitinierung und alternativem Spleißen, wie durch Proteomikdaten und Strukturstudien nahegelegt wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 180-479 umfasst, einschließlich der C-terminalen Zinkfingerdomänen, die für die DNA-Bindung entscheidend sind. Dieses Design kann helfen, sowohl Voll- als auch verkürzte Isoformen, falls vorhanden, nachzuweisen.
• Für den Western Blot sollte ein denaturierendes Gel mit geeigneten Protein-Ladekontrollen verwendet werden, und das beobachtete Band (~55 kDa) sollte anhand der bekannten KLF4-Expression in humanen Zelllinien oder Geweben validiert werden.
• Für ELISA sollte der Antikörper gegen das rekombinante Immunogen oder Zelllysate titriert werden, um optimale Arbeitskonzentrationen zu ermitteln, da polyklonale Präparationen zwischen den Chargen variieren können.
• Da die Reaktivität des Antikörpers für den Menschen aufgeführt ist und KLF4 weit verbreitet in Epithelzellen exprimiert wird, sollten humane Haut- oder Darmepithelzelllysate als positive Kontrollen in Betracht gezogen werden.

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