Anti-KITLG-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P21583

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KITLG-Funktion und -Lokalisierung

• Kit-Ligand (KITLG), auch bekannt als Stammzellfaktor (SCF), Mastzell-Wachstumsfaktor (MGF) und c-Kit-Ligand, ist ein Zytokin, das als Ligand für den Rezeptor-Tyrosinkinase KIT fungiert.
• KITLG spielt eine kritische Rolle beim Zellüberleben, der Zellproliferation, Hämatopoese, Stammzellerhaltung, Gametogenese, Mastzellentwicklung und -migration sowie der Melanogenese.
• Nach Bindung an KIT aktiviert KITLG mehrere Downstream-Signalwege, einschließlich PI3K-AKT-, RAS-MAPK-, JAK-STAT- und PLCγ-Wegen, und koordiniert damit eine Vielzahl von zellulären Antworten.
• Das Protein wird als membrangebundene Form exprimiert, die auf der Zellmembran, im Zytoplasma, Zytoskelett und Zellfortsätzen wie Lamellipodien und Filopodien lokalisiert ist, und kann auch als löslicher Faktor sezerniert werden.
• KITLG wird als Transmembranprotein produziert, das eine proteolytische Spaltung erfährt, um einen löslichen Wachstumsfaktor zu erzeugen, mit einem Molekulargewicht von ca. 31 kDa (UniProt: 30,9 kDa).
• Es wirkt synergistisch mit anderen Zytokinen, insbesondere Interleukinen, um die Signalausgabe in hämatopoetischen und Immunzellen zu verstärken.
• Klinisch sind Mutationen im KITLG mit Störungen wie autosomal-dominanter nicht-syndromischer Taubheit (DFNA69) und Waardenburg-Syndrom Typ 2 assoziiert, was seine Rolle bei der Entwicklung von Melanozyten und der Cochlea unterstreicht.
• Schlüsselwörter deuten auf seine Beteiligung an alternatives Spleißen, Zelladhäsion und Krankheitsvarianten hin und spiegeln seine multifunktionale Natur wider.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogen-Sequenz (aa 120-190) liegt innerhalb der extrazellulären Domäne von KITLG; daher wird erwartet, dass der Antikörper sowohl die membrangebundene als auch die lösliche Form erkennt, vorausgesetzt, das Epitop ist zugänglich.
• Für Western Blotting wird eine Bande um 31 kDa vorhergesagt; aufgrund von Glykosylierung und möglicher Dimerisierung kann das beobachtete Molekulargewicht jedoch variieren; erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden Bedingungen und geeigneten Kontrollen.
• Für Immunfluoreszenz/ICC können Membran- und intrazelluläre Färbungen beobachtet werden; eine Permeabilisierung ist erforderlich, um zytoplasmatische Bestände nachzuweisen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; eine Kombination mit einem monoklonalen Antikörper, der ein anderes Epitop erkennt, wird für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA empfohlen.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem und rattigem KITLG wurde berichtet; validieren Sie dies jedoch in Ihrem spezifischen Probensystem, da die Sequenzhomologie die Affinität beeinflussen kann.
• Da KITLG sezerniert wird, können Zellkulturüberstände oder Serumproben eine Optimierung für den Nachweis erfordern.
• Verwenden Sie geeignete Blockierungsreagenzien, um unspezifische Bindungen zu minimieren, insbesondere in gewebsreichen Mastzellen.

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