Anti-Ki67 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für IF/IFZ, ELISA - P46013

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Ki67-Funktion und -Lokalisierung

• Das Proliferationsmarker-Protein Ki-67 (MKI67) assoziiert mit der Oberfläche mitotischer Chromosomen und wirkt sowohl als Chromosomen-Repellens während der frühen Mitose als auch als Chromosomen-Attraktans während der späten Mitose. Verwandte Referenzen: PMID:27362226, PMID:32879492, PMID:35513709
• Während der frühen Mitose verlagert sich Ki-67 von den Nukleolen an die Chromosomenoberfläche und bildet ausgedehnte bürstenartige Strukturen, die den Zusammenbruch der Chromosomen verhindern, indem sie eine sterische und elektrostatische Ladungsbarriere bereitstellen. Verwandte Referenzen: PMID:27362226
• In der mitotischen Anaphase induzieren die Dephosphorylierung von Ki-67 und die Exposition eines konservierten basischen Patches eine RNA-abhängige Flüssig-Flüssig-Phasentrennung auf der Chromosomenoberfläche, was die Chromosomenclusterung fördert und große cytoplasmatische Partikel aus dem zukünftigen nuklearen Raum ausschließt. Verwandte Referenzen: PMID:32879492, PMID:39153474, PMID:28935370
• Ki-67 bindet an supercoiled DNA und AT-reiche DNA sowie an prämature ribosomale RNAs, was zu seiner Rolle bei der Organisation und Aufrechterhaltung mitotischer Chromosomen beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:10878551, PMID:24867636
• Das Protein lokalisiert sich in Zellkernen von Interphase-Zellen, insbesondere konzentriert in Nukleolen, und assoziiert mit mitotischen Chromosomen während der Zellteilung (Subzellulärer Ort: Chromosom, Zellkern, Nukleolus).
• Ki-67 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung-ähnlichen Modifikationen (Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation), wobei die Phosphorylierung/Dephosphorylierung seine Chromosomenassoziation und Phasentrennungseigenschaften reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:39153474

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 700-800 von humanem Ki67 abdeckt; dieser Bereich liegt innerhalb der zentralen repetitiven Domäne und ist wahrscheinlich im nativen Protein zugänglich.
• Für IF/IFZ sollten Sie die Zellfixierung und -permeabilisierung optimieren, um die Nukleolus- und mitotische Chromosomenfärbung zu erhalten. Proliferierende Zellen wie HeLa oder Jurkat können als positive Kontrollen dienen.
• Für ELISA validieren Sie die Antikörperreaktivität unter Verwendung von rekombinanten Ki67-Fragmenten oder Ganzzell-Lysaten aus proliferierenden im Vergleich zu ruhenden Zellen.
• Da der Antikörper humanes Ki67 erkennt, ist keine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies zu erwarten, es sei denn, es besteht eine hohe Sequenzhomologie im Immunogenbereich.

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