Anti-Ki67 Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P46013

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Ki67-Funktion und -Lokalisierung

• Ki67, codiert durch das MKI67-Gen, ist ein etabliertes Proliferationsmarker-Protein (auch bekannt als Antigen KI-67 oder Antigen Ki67).
• Während der frühen Mitose verlagert sich Ki67 von den Nukleolen an die Chromosomenoberfläche und bildet ausgedehnte bürstenartige Strukturen. Diese hochgeladenen Bürsten wirken als Tensid und verhindern durch sterische und elektrostatische Abstoßung eine Chromosomenaggregation. Verwandte Referenzen: PMID:27362226
• In der Anaphase wechselt Ki67 zu einem Chromosomen-Attraktor, unterliegt einer Dephosphorylierung und einer RNA-abhängigen flüssig-flüssigen Phasentrennung, um das Chromosomenclustering zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:32879492, PMID:39153474, PMID:28935370
• Ki67 bindet DNA mit einer Präferenz für supercoiled und AT-reiche Sequenzen und interagiert auch während der Anaphase mit vorzeitigen ribosomalen RNAs. Verwandte Referenzen: PMID:10878551, PMID:28935370
• Es kann auch zur Chromatinorganisation beitragen, obwohl der direkte Mechanismus unklar bleibt. Verwandte Referenzen: PMID:24867636
• Ki67 lokalisiert sich während der Interphase im Nukleolus und während der Mitose an der Chromosomenoberfläche.
• Das Protein unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das rekombinante Immunogen deckt die Aminosäuren 460-680 von humanem Ki67 (NP_002408.3) ab, was die Epitopspezifität beeinflussen kann. Berücksichtigen Sie dies bei der Entwicklung von Nachweisassays.
• Für den Western Blot beachten Sie das hohe Molekulargewicht (~359 kDa); verwenden Sie SDS-PAGE Gele mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten oder Nasstransfer-Methoden, um einen effizienten Transfer zu gewährleisten.
• Für IHC-P validieren Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen und die Verdünnung des Primärantikörpers im entsprechenden Probensystem. Fügen Sie geeignete positive (z. B. proliferierende Gew Gewebe) und negative Kontrollen ein.
• Dieser Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Maus, was seine Verwendung in Xenograft- oder Murinmodell-Studien ermöglicht; überprüfen Sie jedoch die speziesabhängige Leistung experimentell.
• ELISA-Anwendungen erfordern eine Optimierung der Beschichtungs- und Nachweisprotokolle.

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