Anti-KEAP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14145

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KEAP1-Funktion und -Lokalisierung

• KEAP1 (Kelch-like ECH-associated protein 1), auch als INrf2 oder KLHL19 bezeichnet, ist ein 70 kDa großes zytoplasmatisches und nukleäres Protein, das als substratspezifischer Adapter für den BCR (BTB-CUL3-RBX1) E3-Ubiquitin-Ligase-Komplex fungiert.
• Unter basalen Bedingungen zielt KEAP1 auf den Transkriptionsfaktor NFE2L2/NRF2 für Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau ab und unterdrückt so die Expression zytoprotektiver Gene. Verwandte Referenzen: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695 PMID:15601839 PMID:16006525
• Als wichtiger Sensor für oxidativen Stress enthält KEAP1 hochreaktive Cysteinreste, die eine nicht-enzymatische kovalente Modifikation durch Elektrophile erfahren, was zur Inaktivierung des Ligasekomplexes und zur anschließenden nukleären Akkumulation von NRF2 führt. Verwandte Referenzen: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1 beteiligt sich auch an der selektiven Autophagie durch Interaktion mit SQSTM1/p62; dies sequestriert KEAP1 in Einschlusskörpern, aktiviert NRF2 weiter, während es gleichzeitig die Ubiquitinierung und den Abbau von SQSTM1/p62 vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:20452972 PMID:28380357
• Zusätzliche Substrate des KEAP1-haltigen Ubiquitin-Ligase-Komplexes umfassen BPTF und PGAM5, was seine breiten regulatorischen Rollen unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 ist breit in menschlichen Geweben exprimiert, wobei die höchsten Spiegel in der Skelettmuskulatur gefunden werden; das Protein enthält charakteristische Kelch-Wiederholungen und eine BTB-Domäne und unterliegt post-translationalen Modifikationen einschließlich S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 320–510 von menschlichem KEAP1; dieser Bereich kann die Erkennung von全长-KEAP1 und potenziell konservierte Epitope über Spezies hinweg ermöglichen. Überprüfen Sie die Spezifität in Ihrem Probensystem.
• Für Western Blotting erwarten Sie eine Bande, die dem vorhergesagten Molekulargewicht von ca. 70 kDa entspricht. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann KEAP1 sowohl in zytoplasmatischen als auch in nukleären Kompartimenten nachgewiesen werden. Optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte.
• Die berichtete Kreuzreaktivität umfasst Mensch, Maus und Ratte; die Leistung in jeder Spezies sollte jedoch mit relevanten Geweben oder Zelllinien validiert werden.
• Für ELISA deutet das rekombinante Proteinimmunogen auf eine potenzielle Verwendung in Capture- oder Nachweissetups hin; bestätigen Sie die Bindungsaffinität und Spezifität mit Ziel- und Kontrollproteinen.

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