Anti-KEAP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q14145

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KEAP1-Funktion und -Lokalisierung

• KEAP1 (Kelch-like ECH-associated protein 1), auch bekannt als INrf2 oder KLHL19, fungiert als substratspezifischer Adapter für den BCR (BTB-CUL3-RBX1) E3-Ubiquitin-Ligase-Komplex. Verwandte Referenzen: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• Es dient als kritischer Redox-Sensor, indem es den Transkriptionsfaktor NFE2L2/NRF2 unter basalen Bedingungen für Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau markiert und so niedrige Spiegel der Expression zytoprotektiver Gene aufrechterhält. Verwandte Referenzen: PMID:15601839 PMID:16006525
• Bei oxidativem oder elektrophilem Stress werden reaktive Cysteinreste in KEAP1 kovalent modifiziert, was den Ligase-Komplex inaktiviert und NRF2 ermöglicht, im Kern zu akkumulieren und die Expression von Phase-II-Entgiftungsenzymen anzutreiben. Verwandte Referenzen: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• Selektive Autophagie-Wege, die SQSTM1/p62 beinhalten, können KEAP1 sequestrieren und zur NRF2-Aktivierung führen; der BCR(KEAP1)-Komplex ubiquitiniert auch SQSTM1/p62 und verstärkt so dessen eigenen Abbau. Verwandte Referenzen: PMID:20452972 PMID:28380357
• Zusätzliche Substrate des BCR(KEAP1)-Komplexes umfassen BPTF und PGAM5, was seine Rolle in der zellulären Regulation erweitert. Verwandte Referenzen: PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 ist vorwiegend zytoplasmatisch, kann sich aber auch im Kern lokalisieren, was im Einklang mit seinen regulatorischen Funktionen steht.
• Es ist breit in menschlichen Geweben exprimiert, wobei die höchsten Spiegel in der Skelettmuskulatur beobachtet werden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung, und es enthält Kelch-Wiederholungsdomänen, die für die Substraterkennung kritisch sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von KEAP1 ca. 70 kDa; verwenden Sie geeignete positive Kontrollen aus Lysaten von Mensch, Maus oder Ratte, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC sollten Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimieren, um sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre KEAP1-Pools zu detektieren.
• Für Sandwich-ELISA-Anwendungen wird die Paarung mit einem validierten Fang-Antikörper empfohlen; validieren Sie das Antikörperpaar in der relevanten Probenmatrix.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz variieren; es ist ratsam, neue Chargen in einem Pilotexperiment vor großangelegten Studien zu testen.

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